Obecná analýza mozkomíšního moku

Obecná analýza mozkomíšního moku zahrnuje počítání počtu a složení krevních elementů. Normálně 1 μl mozkomíšního moku obsahuje 4-6 buněk (lymfocytů). Při patologických procesech (zánět mozkových plen, encefalitida, volumetrické procesy, akutní selhání mozkového oběhu) se počet buněčných elementů zvyšuje. Při hnisavé meningitidě se neutrofily v mozkomíšním moku objevují ve velkém množství (až několik desítek tisíc v 1 μl), při serózní meningitidě se počet buněk zvyšuje z několika desítek na 1-2 tisíce v důsledku lymfocytů. Poměr neutrofilů a lymfocytů se vypočítává v procentech (cytogram). Často se detekuje a počítá počet erytrocytů. Kromě toho lze v mozkomíšním moku detekovat eosinofily (u parazitárních onemocnění centrálního nervového systému), makrofágy (u vleklých zánětlivých procesů) a atypické buňky (u nádorů mozkových plen, leukémie). Při podezření na přítomnost atypických buněk vyšetřuje cytolog stěr mozkomíšního moku. Počítání cytózy a cytogramu má nejen diagnostickou hodnotu, ale také umožňuje vyhodnotit účinnost antibakteriální terapie u bakteriální meningitidy.

Cytochemické metody se používají jako doplňkové testy, které nám umožňují posoudit funkční stav buněk mozkomíšního moku (stanovení obsahu glykogenu a aktivity myelopyroxidázy v neutrofilech, aktivity alkalické fosfatázy v lymfocytech atd.).

Je žádoucí spočítat buňky v mozkomíšním moku do 1-2 hodin po punkci. V pozdějších stádiích se buněčné složení může významně změnit v důsledku lýzy buněk, precipitace a tvorby fibrinových sraženin. Vzhledem k tomu, že erytrocyty v mozkomíšním moku se rychle lýzují, stanovují se pouze za přítomnosti čerstvé krve v subarachnoidálním prostoru: po traumatických punkcích, subarachnoidálním krvácení, parenchymatózním krvácení s pronikáním erytrocytů do likvorových cest, při žilních trombotických okluzích s otokem žil a sekundární difuzí krevních buněk žilní stěnou.

Horní hranice normálního počtu leukocytů v mozkomíšním moku je 5 v 1 μl. Někteří syfilologové však za horní hranici normy považují nikoli 5, ale 9 buněk. Mírná pleocytóza až 20 v 1 μl je obvykle pozorována po pyelografii, spinální anestezii a mrtvici. Nesrovnatelně závažnější změny jsou pozorovány u infekčních onemocnění centrálního nervového systému. Akutní bakteriální meningitida je obvykle doprovázena mnohem výraznější pleocytózou než aseptická meningitida. U většiny bakteriálních meningitid je tedy pleocytóza více než 1000 v 1 μl; v časných stádiích nebo v případě částečně léčené meningitidy (!) však může být pleocytóza menší. U aseptické meningitidy je taková vysoká pleocytóza vzácná. V případech, kdy je pleocytóza obzvláště vysoká (5 000–10 000 v 1 μl), lze kromě meningitidy předpokládat i rupturu intracerebrálního nebo perimeningeálního abscesu; v tomto případě je obvykle pozorován bleskově rychlý nárůst klinických symptomů. Zvýšení koncentrace polymorfonukleárních leukocytů je obvykle pozorováno u bakteriální meningitidy. Zvýšený obsah lymfocytů je obvykle pozorován u chronických infekcí (tuberkulózní a plísňová meningitida), neléčených bakteriálních infekcí, virových infekcí, neinfekčních zánětlivých procesů (například exacerbace roztroušené sklerózy). Eozinofilie je vzácná a indikuje helmintiózu, včetně cysticerkózy, a někdy je také pozorována u tuberkulózní meningitidy, lymfomů CNS a cizích těles.

Imunologické metody

Používají se metody založené na stanovení antigenů a protilátek patogenů. Metoda RLA se nejčastěji používá k detekci antigenů meningokoků, pneumokoků a Haemophilus influenzae typu b. K diagnostice tuberkulózní meningitidy se používá enzymatický imunosorbentní test (ELISA); při podezření na herpetickou encefalitidu se specifické protilátky stanovují v mozkomíšním moku.

Polymerázová řetězová reakce (PCR) je široce zavedena do praxe, protože umožňuje identifikovat převážnou většinu patogenů neuroinfekcí a v praktických podmínkách stanovit etiologii neuroinfekce u 90 % pacientů. Výhodami metody jsou vysoká citlivost a specificita, schopnost detekovat fragmenty genomu patogena během léčby a v případě potřeby stanovit mikrobiální zátěž. Pro snížení nákladů se doporučuje nejprve provést reakci s primery běžných patogenů (meningokok, pneumokok, Haemophilus influenzae typu b, enteroviry) a poté s vzácnějšími patogeny (gramnegativní bakterie, boreliózy, mykobakterie tuberkulózy, herpesviry, viry - patogeny dětských kapénkových infekcí atd.). Obraz mozkomíšního moku závisí na načasování vyšetření a léčbě.

Cytologické vyšetření mozkomíšního moku někdy umožňuje identifikaci atypických buněk přítomných i v minimálním množství. Jedná se o poměrně důležitou metodu pro detekci nádorových lézí centrálního nervového systému.

Zánětlivé procesy doprovázené leukocytózou mohou mít také určité cytologické charakteristiky. Lymfocyty objevující se v mozkomíšním moku v reakci na virovou infekci tak mohou mít jasně viditelná jádra, kvůli nimž jsou někdy zaměňovány se maligními buňkami. Herpes encefalitida může být doprovázena výskytem velkých intranukleárních inkluzí v lymfocytech nebo ependymocytech; takový nález je patognomický. U kryptokokových infekcí mohou být kvasinkám podobné kolonie detekovány buď ve volném stavu, nebo intracelulárně v makrofágech. Subarachnoidální krvácení vede k výskytu makrofágů (erytrofágů) natažených mnoha vakuolami. Makrofágy jsou zpočátku naplněny erytrocyty a lipidovými produkty jejich rozpadu a následně hemosiderinem. U některých střádacích chorob, jako je Tay-Sachsova choroba, jsou detekovány makrofágy s pěnivou cytoplazmou naplněnou produkty rozpadu gangliových buněk. Identifikace nádorových buněk je založena na detekci řady cytologických znaků charakteristických pro neoplastický proces. Spolehlivost cytologické diagnózy nádoru je větší, čím více neoplastických znaků je detekováno. Nejčastěji se cytologické vyšetření mozkomíšního moku používá k diagnostice poškození CNS u akutní leukémie a lymfomů, které se obvykle šíří do subarachnoidálního prostoru. Pro imunodiagnostiku se používají speciální protilátky proti B- a T-lymfocytům. U obecných zánětlivých procesů tedy převládají T-lymfocyty a u maligních procesů je pozorována převážná proliferace patologických klonů B-lymfocytů. Imunohistochemické studie se používají k identifikaci specifické formy leukémie. Je však třeba mít na paměti, že v případech leukémie doprovázené uvolňováním patologických buněk do krevního oběhu mohou být výsledky vyšetření mozkomíšního moku falešně pozitivní v důsledku vstupu těchto buněk s krevním oběhem. Je důležité si uvědomit, že cytologické vyšetření mozkomíšního moku je účinné pouze u těch maligních procesů, do kterých jsou zapojeny mozkové pleny. Karcinomatóza mozkových plen se nejčastěji vyskytuje při metastázách rakovinných nádorů plic, mléčné žlázy, břišní dutiny a melanomu.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]