Krevní test na virus Epsteina-Barrové na protilátky a PCR: jak projít, normy

Herpesem jsme zvyklí chápat nevzhledné bolestivé puchýřnaté vyrážky na obličeji v oblasti rtů, které následně tvoří hnědé krusty. Bohužel, toto je jen jedna z tváří herpes viru, který se u lidí může vyskytovat v 8 formách. To, co obvykle nazýváme herpesem, je virus typu 1 neboli virus herpes simplex. Virus typu 2 způsobuje genitální herpes, typ 3 - "plané neštovice" a pásový opar, typ 4 - infekční mononukleózu a několik dalších poměrně nebezpečných patologií atd. Tento seznam by mohl pokračovat dále, ale my se zaměříme na herpes virus typu 4, který se jinak nazývá virus Epstein-Barrové. Zkusme zjistit, co je herpes virus typu 4, proč je nebezpečný, kdy a proč se provádí test na virus Epstein-Barrové a co ukazují výsledky laboratorních testů.

Co je herpesvirus typu 4?

Herpesvirus typu 4, jako jednu z variant herpesvirové infekce, popsal před 53 lety anglický virolog Michael Epstein. Při práci na projektu profesorovi asistovala jeho doktorandka Yvonne Barrová. Právě těmto lidem virus vděčí za své jméno. 15 let po objevení viru však byl jeho vědecký název změněn na lidský herpesvirus 4 a před rokem byl virus nazván lidský gamavirus typu 4.

Ale co je virus Epstein-Barrové? Stejně jako každý jiný virus se virion (virová částice) herpesviru typu 4 skládá z genetického materiálu (v tomto případě dvouvláknové DNA) a okolního proteinového obalu (kapsidy). Kromě toho je virus obklopen membránou, která mu pomáhá snadno proniknout do buněk hostitele.

Jakýkoli virus je nebuněčná forma, která je infekčním faktorem a nemůže se vyvíjet a reprodukovat mimo buňky živého organismu. Oblíbeným prostředím herpesviru typu 4 jsou epitelové buňky nosohltanu. Nepohrdají ani leukocyty a dávají přednost jedné z jejich odrůd, nazývané B-lymfocyty. Právě B-lymfocyty se aktivně podílejí na zajištění imunitní obranyschopnosti těla. Při kontaktu s antigenem, kterým je v našem případě herpesvirus typu 4 (nebo spíše jeho antigeny), B-lymfocyty produkují protilátky (imunoglobulinové proteiny). Ty lze detekovat v krvi pacienta provedením analýzy na virus Epstein-Barrové (EBV).

Herpesvirus typu 4 má 4 antigeny, které se objevují v přesně definovaném pořadí:

• EA je časný antigen, který se objevuje v počáteční fázi onemocnění, kdy jsou virové částice ve fázi syntézy (primární akutní infekce nebo reaktivace latentního viru při snížené imunitě),
• VCA je kapsidový antigen, který je obsažen v proteinové slupce a také patří k časným, protože klinicky se onemocnění v tomto období nemusí ani projevit,
• MA – membránový antigen, objevuje se, když je virion již vytvořen,
• EBNA – nukleární (polypeptidový nebo jaderný) antigen patří mezi pozdní antigeny, protilátky proti nimž lze detekovat i několik měsíců po onemocnění a zůstávají v krvi po celý život.

Herpesvirus typu 4 je velmi zákeřný. Protože je virus mimo živý organismus neaktivní, lze se jím nakazit pouze od osoby, která je zdrojem infekce. A vůbec není nutné, aby se u ní projevovaly všechny příznaky onemocnění; infekce může být latentní, maskovaná jako běžná únava. Například syndrom chronické únavy je ve většině případů spojen s virem Epstein-Barrové.

Jednotlivé viriony se nacházejí v krvi, slinách, spermiích, vaginálních sekretech a tkáních různých orgánů. Virové částice se spolu se slinami a krví mohou dostat do předmětů kolem nás, kde zůstanou neaktivní, dokud se nějakým způsobem nedostanou do lidského těla. Ve velké většině případů dochází k infekci kapénkami ve vzduchu nebo kontaktem (polibkem). Možný je však i intrauterinní přenos viru z matky na plod, infekce během krevní transfuze (pokud dárcovská krev obsahovala virové viriony) a pohlavní styk.

Po vniknutí do těla a proniknutí do buněčných struktur může trvat 5 až 50 dní, než se nemoc projeví. Může se však projevit i jinak, a to v latentní formě, jak je tomu ve většině případů.

Ano, podle výzkumu prodělalo přibližně 90 % dospělé populace alespoň jednou v životě herpes infekci spojenou s virem EBV. Většina lidí to ani neví, protože jejich tělo je schopno virovou infekci ubránit. Není tomu tak ale vždy.

Jak se projevuje virus Epstein-Barrové?

Nejčastěji se lékaři ve své praxi setkávají s následujícími typy herpesvirové infekce typu 4:

• Chronická forma (objevuje se po akutní fázi onemocnění, má některé obecné příznaky špatného zdravotního stavu),
• Latentní nebo skrytá forma (neexistují žádné příznaky, ale virus zůstává aktivní a uvolňuje se do životního prostředí),
• Pomalá forma (méně častá, příznaky se objevují jeden po druhém po dlouhou dobu a končí smrtí pacienta).

Lidé se poprvé nakazí virem Epstein-Barrové, a to především v dětství a dospívání. Vrchol incidence nastává mezi 14. a 18. rokem věku.

Primární virová infekce má 3 různé formy:

• asymptomatické (bez klinických projevů),
• respirační (příznaky respirační infekce: horečka, výtok z nosu, celková slabost atd.),
• Infekční mononukleóza s triádou hlavních příznaků: vysoká teplota, příznaky bolesti v krku se nažloutlými krustami na mandlích, zvětšení orgánů, jako jsou játra a slezina; dochází ke zvýšení hladiny leukocytů a zvětšení lymfatických uzlin.

Existuje několik možností, jak se dostat z akutní fáze onemocnění:

• úplné uzdravení,
• příznaky onemocnění mizí, ale virus zůstává v těle a rozvíjí se, i když již nevede k patrným změnám v buňkách (stav nosiče),
• Neexistují žádné příznaky onemocnění, virus neopouští tělo, ale také vykazuje malou aktivitu (latentní forma),
• reaktivace viru z latentní formy,
• chronický průběh infekce (s relapsy onemocnění, chronická aktivní forma, generalizovaná s poškozením orgánů a tělesných systémů).

Důsledkem dlouhodobého pobytu viru v těle může být:

• Chronická forma infekční mononukleózy.
• Hematofagocytární syndrom: stabilní horečka, snížený počet krevních složek (zvýšená srážlivost krve), zvětšená játra a slezina, krvácení do sliznic, žloutenka (v důsledku jaterní dysfunkce), zvětšené lymfatické uzliny, neurologické příznaky.
• Latentní forma s rozvojem sekundární imunodeficience: dlouhodobá hypertermie, celková slabost, zvětšení a bolestivost lymfatických uzlin, bolesti svalů a kloubů, časté infekční onemocnění.
• Vývoj autoimunitních patologií ve formě lupus erythematosus, revmatoidní artritidy atd.
• Projevy syndromu chronické únavy se zhoršením celkové pohody a výkonnosti.
• Generalizovaná forma chronické infekce s poškozením centrálního nervového systému, srdečního myokardu, ledvin, jater a plic.
• Vývoj onkologických onemocnění (lymfocytární leukémie a lymfomy), u kterých je pozorován patologický nárůst počtu buněk lymfatického systému. Herpesvirus typu 4 neničí buňky nosiče, ale nutí je k aktivnímu množení, v důsledku čehož jsou detekovány novotvary z lymfoidní tkáně.

Jak vidíme, virus Epstein-Barrové není tak neškodný, jak se na první pohled zdá, což znamená, že by se s ním nemělo zacházet nedbale. Herpes virus typu 4 se navíc vyznačuje častými epizodami virové nosičství a latentní formou, nemluvě o různých formách chronické infekce, kdy člověk zůstává zdrojem infekce, aniž by o tom tušil.

V tomto případě lze přítomnost infekčního agens v těle určit pouze pomocí speciální analýzy na virus Epstein-Barrové, jehož biomateriálem je obvykle krev.

Indikace postupu Test na virus Epstein-Barrové.

Vzhledem k tomu, že infekci herpesvirem typu 4 není někdy tak snadné odhalit, není vždy podezřelá. Existují však určité příznaky, podle kterých může lékař podezřívat přítomnost viru v těle:

• silně oslabený imunitní systém (ohrožení jsou pacienti s HIV infekcí a AIDS, pacienti po transplantaci orgánů nebo chemoterapii),
• zvětšení regionálních lymfatických uzlin v oblasti brady a týlní oblasti hlavy a jejich bolestivost, zejména pokud je to pozorováno po krevní transfuzi nebo transplantaci orgánů od dárce.
• akutní respirační virová infekce (ARVI), vyskytující se na pozadí velmi vysokých teplot (38-40 stupňů),
• výskyt příznaků infekční mononukleózy, která se nejčastěji vyskytuje pod vlivem viru Epstein-Barrové.

I když daná osoba nemá výše uvedené příznaky, může být specialista podezřelý na základě některých výsledků běžných testů (obecný krevní rozbor a biochemie) a také na základě studií imunitního stavu.

Kompletní krevní obraz na virus Epstein-Barrové může ukázat:

• zvýšení počtu lymfocytů,
• nízký hemoglobin, což naznačuje snížení hladiny červených krvinek,
• zvýšená srážlivost krve v důsledku velkého počtu krevních destiček,
• výskyt virocytů (atypických lymfocytů strukturou podobnou monocytům).

Biochemický krevní test, který poskytuje informace o stavu vnitřních orgánů, ukáže změny ve funkci jater a sleziny.

Imunotest na EBV může ukázat změnu v počtu specifických lymfocytů, rozdíl v počtu imunoglobulinů různých tříd (dysimunoglobulinemie) a nedostatek imunoglobulinu G, což naznačuje slabý imunitní systém a jeho neschopnost zastavit nápor viru.

Takové výsledky nespecifických analýz mohou lékaře upozornit, ale stále je nemožné přesně říci, s čím mají co do činění. Vše zůstane ve fázi předpokladů a předběžné diagnózy. Ve většině případů lékaři podezřívají latentní formu infekční mononukleózy, i když se stejným způsobem mohou projevit i jiné virové patologie (chřipka, hepatitida atd.).

Vzhledem k vysokému výskytu hepatitidy 4. typu a možnosti jejího přenosu z matky na dítě bude test na virus Epstein-Barrové užitečný i při plánování těhotenství. Pokud matka již dříve prodělala infekci, její tělo si proti ní vytvořilo protilátky. Reinfekce je obvykle vyloučena díky vytvoření silné imunity a pokud k ní dojde, nebude mít již takové následky, jaké jsou možné při prvním setkání s virem. Imunita bude omezovat aktivitu viru po celý život, i když samotný virus zůstane uvnitř těla, stejně jako kterýkoli z herpes virů.

Pokud se nastávající matka během těhotenství nakazí virem herpesu, může to vést k potratu a předčasnému porodu, nebo virus negativně ovlivní nitroděložní vývoj dítěte.

Onkolog může nařídit test EBV, pokud existuje podezření na Burkettovo lymfom nebo k diagnostice nádorových procesů u lidí s HIV. Terapeut může tento test použít k diagnostice herpes infekcí (diferenciální diagnostika k určení typu viru). Někdy se test používá také k posouzení účinnosti léčby.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Příprava

V závislosti na typu výzkumu může být biomateriálem krev, sliny, moč, sputum, vzorek plodové vody, seškrábání z děložního čípku nebo močové trubice, mozkomíšní mok (CSF). Nejčastěji se lékaři uchylují k krevním testům, které jsou považovány za nejinformativnější.

Je zřejmé, že některé faktory mohou negativně ovlivnit kvalitu a množství biomateriálu, proto je vhodné den předem dodržovat určitá pravidla:

• Veškeré testy (zejména krevní testy) se doporučuje provádět ráno na lačný žaludek. Poslední jídlo by mělo být nejpozději 12 hodin před odběrem krve, proto je lepší pít k večeři vodu.
• Za nejpřijatelnější materiál pro analýzu viru Epstein-Barrové se považuje žilní krev a před darováním krve ze žíly se vždy doporučuje 15minutový odpočinek, pokud osoba právě dorazila do laboratoře,
• Aby odběr krve proběhl bez následků a výsledky testů byly spolehlivé, nedoporučuje se 12 hodin před zákrokem vykonávat aktivní fyzickou práci ani sportovat, pít alkohol ani kouřit.
• Výsledky testů mohou být také ovlivněny léky, které užíváte. Užívání léků byste měli přestat alespoň 2 dny před testem. Pokud to není možné, musíte o lécích, které užíváte, informovat laboratorní sestru.
• Během těhotenství se před testováním na EBV provádí test na toxoplazmózu, aby se vyloučila falešně pozitivní reakce.
• Pokud se u dítěte mladšího 5 let provádí krevní test na virus Epstein-Barrové, mělo by dítěti půl hodiny před zákrokem podat hodně převařené vody, kterou by mělo pít v relativně malých porcích.

Pokud se k analýze odebírá jiný biomateriál, je třeba si s lékařem předem ujasnit všechny nuance přípravy na analýzu v závislosti na použitém materiálu.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

Technika Test na virus Epstein-Barrové.

Lékaři přikládají důležitou roli v diagnostice herpes typu 4 a infekční mononukleózy specifickým testům, které pomáhají identifikovat DNA viru nebo unikátní protilátky v biomateriálu pacienta. Mezi hlavní typy laboratorních testů používaných k detekci viru Epstein-Barrové v lidském těle patří enzymově vázaný imunosorbentní test (ELISA) a PCR diagnostika. Podívejme se blíže na podstatu obou metod a zvláštnosti jejich provedení.

EBV enzymatický imunotest

ELISA je vyšetření (analýza) žilní krve pacientů na protilátky proti viru Epstein-Barrové. Výsledkem diagnostiky je detekce imunoglobulinů typu IgG nebo IgM (celkem jich existuje 5 typů) proti jednomu ze 3 antigenů viru (časný, kapsidový nebo jaderný).

Analýza se provádí v imunologické laboratoři, kde se pacientovi odebere asi 10 ml krve z žíly. Biomateriál se poté ponechá čtvrt hodiny při pokojové teplotě, během které se krev srazí. Sraženina se opatrně oddělí od tekuté části. Tekutina se odstředí a získá se čisté krevní sérum. To se podrobí dalšímu vyšetření.

Myšlenka metody vznikla na základě dat, že naše tělo produkuje specifické protilátky proti každému typu viru a bakterie, které do těla pronikají zvenčí. Tělo je rozpozná jako cizí a zničí je pomocí unikátních protilátek, které pevně přilnou k antigenu.

Podstata ELISA analýzy je založena na této reakci. Protilátky s připojenými značkami se spojí s antigeny. Na značky se aplikuje látka, která při reakci se speciálním enzymem změní barvu vzorku. Čím více takových „řetězců“, tím intenzivnější je barva biomateriálu.

Enzymatický imunotest lze provést třemi metodami:

• Přímá ELISA. Testovací tekutina se umístí do jamek a nechá se asi půl hodiny, aby se antigeny mohly přichytit ke stěnám jamek. K sorbovaným antigenům se přidá tekutina se značenými protilátkami. Po uplynutí požadované doby (od půl hodiny do 5 hodin), kdy jsou protilátky detekovány a navázány na antigeny, se tekutina slije, jamky se pečlivě promyjí a přidá se do nich enzym. Koncentrace viru v jednotce krve se stanoví kolorizační metodou.
• Nepřímá ELISA. Při této metodě se k antigenům sorbovaným na povrchu jamek přidá testované krevní sérum a značené protilátky. Výsledkem jsou 2 typy vazů, z nichž některé jsou značené. Výsledek závisí na koncentraci antigenů v testovaném vzorku. Čím více neznačených protilátek, tím méně sloučenin značených enzymem.

Dále se do promyté kompozice přidá speciální činidlo, které se používá ke stanovení enzymatické aktivity komplexů antigen-protilátka.

• „Sendvič“. Liší se od nepřímé metody tím, že zpočátku se na povrchu nesorbují antigeny, ale protilátky. K nim se přidá roztok obsahující studované antigeny. Po promytí nosiče se přidají protilátky s enzymatickými značkami. Přebytečné protilátky se znovu odstraní a pomocí peroxidu vodíku se získá barevná látka, která se studuje spektrometrickou metodou.

Tento typ analýzy umožňuje nejen identifikovat specifické protilátky a stanovit koncentraci antigenů, ale také objasnit stádium onemocnění. Faktem je, že různé antigeny viru Epstein-Barr se objevují v různých stádiích herpes infekce, což znamená, že protilátky proti nim se produkují v určitém období onemocnění.

Protilátky IgG proti časnému antigenu (IgG EA) se tedy v krvi objevují 1–2 týdny po infekci, kdy je onemocnění v akutním stádiu nebo ve stádiu reaktivace viru. Imunoglobuliny tohoto typu mizí po 3–6 měsících. Při chronickém průběhu virové infekce jsou tyto protilátky obzvláště četné a v atypické formě zcela chybí.

Protilátky IgG proti kapsidovému antigenu (IgG VCA) se také objevují brzy, během prvních 4 týdnů onemocnění, ale jejich největší počet je určen druhým měsícem infekce. V akutní fázi se nacházejí u většiny pacientů, ale nemusí se objevit u dětí. V chronickém průběhu onemocnění, zejména v obdobích reaktivace viru, je množství IgG VCA obzvláště vysoké. Tyto protilátky zůstávají v lidské krvi navždy, stejně jako samotný virus, což naznačuje vytvořenou imunitu vůči infekčnímu agens.

Protilátky IgM proti kapsidovému antigenu (IgM VCA) se mohou objevit ještě před prvními příznaky onemocnění. Jejich koncentrace (titry) jsou obzvláště vysoké v prvních 6 týdnech onemocnění. Tento typ protilátek je charakteristický pro akutní infekci a reaktivaci chronické infekce. IgM VCA mizí po 1–6 měsících.

Protilátky IgG proti nukleárnímu genu (IgG EBNA) mohou naznačovat, že se osoba dříve přímo setkala s herpetickou infekcí. V akutní fázi onemocnění jsou detekovány extrémně vzácně, obvykle se objevují během období rekonvalescence (ve 3. až 10. měsíci). V krvi je lze detekovat i několik let po infekci.

Detekce jednotlivých antigenů neposkytuje úplný obraz onemocnění, proto by se testy na různé protilátky měly provádět společně. Například pokud je přítomen pouze IgM VCA a IgG EBNA není detekován, jedná se o primární infekci.

Enzymový imunotest bohužel často nestačí k detekci primární herpes infekce nebo vrozené patologie. V druhém případě nemusí být protilátky detekovány vůbec. Jako potvrzující test na primární onemocnění se používá molekulární vyšetření krve nebo jiného biologického materiálu na virus Epstein-Barrové.

Analýza PRC pro virus Epstein-Barrové

Tato analýza se provádí ve fázi akutní primární infekce, jinak bude její výsledek nesprávný.

Podstata metody PCR (polydimenzionální řetězová reakce) spočívá v tom, že každý infekční agens má svou vlastní sadu genů obsažených v molekule DNA. DNA patogena je v biomateriálu odebraném k výzkumu obsažena v malém množství (samotné viry mají mikroskopickou velikost), takže je velmi obtížné situaci posoudit. Pokud se však provede specifická reakce, množství genetického materiálu se výrazně zvýší, což umožní pojmenovat patogen.

Pomocí jednorázových nástrojů se odebírá materiál pro molekulární výzkum, který se umístí do speciálního zařízení pro analýzu. Zařízení je termostat se speciálním programem - termocyklerem nebo zesilovačem. Zařízení provede celý cyklus PRC několik desítekkrát (asi 2-3 minuty), který má 3 fáze:

• Denaturace (při teplotě 95 stupňů se oddělují řetězce DNA).
• Žíhání (při teplotě 75 stupňů se do studovaného materiálu zavádějí speciálně připravené „primery“ pro EBV, které se navážou na DNA viru).
• Prodloužení neboli množení genetického materiálu (do semena se při teplotě 72 stupňů přidá speciální enzym, který znovu vytvoří nový řetězec DNA, čímž se zdvojnásobí množství genetického materiálu).

Pokud se celý cyklus polydimenzionální reakce provede 50krát, množství materiálu se zvýší 100krát. To znamená, že bude mnohem snazší identifikovat patogen.

Test na virus Epstein-Barrové u dítěte

Jak již víme, virus Epstein-Barrové může způsobit rozvoj mnoha onemocnění. Jakmile se dostane do lidského těla, zůstává jeho trvalým obyvatelem a pouze dobře koordinovaná práce imunitního systému mu neumožňuje aktivně parazitovat uvnitř buněk.

Téměř 95 % dospělé světové populace žije s EBV uvnitř a většina z nich se s virem seznámila v raném dětství. Někteří ho zdědili po matce, jiní se nakazili od rodičů a příbuzných, kteří se k dítěti vrhli s polibky, nebo kapénkami ve školce či škole (infekční onemocnění tam obvykle nabývají „univerzálních“ rozměrů).

Malé děti obecně mají tendenci strkat si všechno do úst a největší počet virionů se nachází ve slinách. A pokud několik dětí olizuje stejnou hračku ve školce, zatímco jsou učitelky zaneprázdněny svými vlastními záležitostmi, pak není divu, že se virus tak aktivně šíří ve velkých skupinách dětí.

EBV lze snadno nazvat nemocí dětí a mládeže, protože v dospívání má virus již v těle polovina dětí (a do 30 let asi 90 % dospělých). Děti v různém věku onemocní svým vlastním způsobem. Do jednoho roku, kdy dítě aktivně nekomunikuje s lidmi, je pravděpodobnost, že onemocní, malá. Dítě starší roku, i když nechodilo do školky, se stává společenskějším, hraje si s vrstevníky na ulici, chodí s matkou na aktivní nákupy atd. a pravděpodobnost nakažení virem se výrazně zvyšuje.

To ale není důvod k tomu, aby dítě bylo zavřené mezi 4 stěnami. Ve věku 1-3 let probíhá onemocnění ve velké většině případů bez jakýchkoli příznaků, snad s výjimkou mírného zvýšení teploty a mírné rýmy, připomínající nachlazení. Ukazuje se, že čím dříve se dítě s virem seznámí, tím snadněji takové seznámení probíhá.

Není dobré, pokud dítě onemocní bez výskytu protilátek IgG VCA v krvi, což může naznačovat, že imunita vůči viru nebyla vytvořena a reaktivace viru je možná, jakmile imunitní systém oslabí. Důvodem je s největší pravděpodobností nedokonalost imunitního systému malých dětí, který se formuje již několik let.

Školní život poskytuje ještě více předpokladů pro vznik onemocnění, zejména v dospívání, kdy mladí lidé aktivně praktikují líbání. U dětí starších 3 let je však onemocnění méně často asymptomatické. Ve většině případů se lékaři setkávají s infekční mononukleózou s jejími charakteristickými příznaky.

Přestože patologie může mít dlouhý průběh (asi 2 měsíce), není tak nebezpečná a nevyžaduje užívání závažných léků. Lékaři předepisují protizánětlivé a antivirové léky, pokud se připojí bakteriální infekce, vyhledávají pomoc antibiotik. Mimochodem, peniciliny se v tomto případě nedoporučují, protože mohou vyvolat kožní vyrážku.

Nemyslete si, že pokud dítě nebo dospívající onemocní infekční mononukleózou, znamená to, že se v jejich těle usadil virus Epstein-Barrové. Toto onemocnění má i jiné méně časté patogeny, jako je cytomegalovirus (herpesvirus typu 5). Aby lékaři pochopili, s čím se potýkají, předepisují test na virus Epstein-Barrové a v případě potřeby i další laboratorní testy.

Je také pravda, že infekční mononukleóza není jediným projevem EBV v dětství. S tímto patogenem jsou spojena i další onemocnění, ale v našem regionu jsou vzácná.

Burkittův lymfom (kterému EBV vděčí za svou detekci) se tedy vyskytuje hlavně u dětí v afrických zemích, velmi vzácně v Americe a ještě vzácněji v Evropě (a to pouze na pozadí AIDS). U dětí ve věku 3-8 let se vyskytuje nádor čelisti s poškozením lymfatických uzlin, ledvin a dalších orgánů.

Rakovina nosohltanu, významný podíl dalších lymfomů, chlupatá leukoplakie úst - to vše jsou projevy EBV na pozadí výrazně snížené imunity, která se vyskytuje při HIV infekci a jejím pozdějším stádiu AIDS.

Vrozená imunodeficience a přidání viru Epstein-Barrové je nebezpečná směs, která může vést k rozvoji proliferativního syndromu u dítěte. V tomto případě zvýšení počtu B-lymfocytů vede k výskytu granulí v mnoha orgánech, což brání jejich normálnímu fungování. Jedná se o onemocnění s vysokou úmrtností, ale nevyvíjí se na pozadí normální imunity.

Dá se říci, že v dětství je virus Epstein-Barrové nebezpečný zejména v případech imunodeficience v důsledku rozvoje různých komplikací. Ve většině případů se vše omezuje na infekční mononukleózu. A ačkoli nevyžaduje zvláštní léčbu, lékaři stále dávají přednost stanovení povahy patogenu, pro což je dítěti předepsán obecný krevní test, enzymový imunotest a PCR.

Vzhledem k tomu, že v dětství dochází hlavně k primární infekci, je docela možné omezit se pouze na kompletní krevní obraz a PCR, což je při první detekci onemocnění poměrně informativní.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ]

Normální výkon

Výsledky PCR analýzy se zpracovávají elektroforézou nebo pomocí značených „primerů“. V druhém případě stačí jednoduše přidat činidlo (chromogen) a barevně určit, zda jsou ve vzorku viriony. Pozitivní výsledek elektroforézy je indikován, když jsou ve studovaném vzorku detekovány řetězce DNA různých délek.

Během inkubační doby onemocnění a asymptomatického vironosičství dá PCR negativní výsledek, stejně jako v případě absolutní absence viru v těle. Na začátku vývoje primární infekce a v jejích raných stádiích může PCR v reálném čase dát pozitivní i negativní výsledky, což situaci nijak neobjasňuje.

Avšak uprostřed onemocnění (akutní fáze), v jeho chronickém průběhu nebo reaktivaci viru (exacerbace) a v případě atypických forem bude analýza pozitivní. Pokud je člověk nemocný delší dobu a virus v jeho těle je v neaktivním stavu, PCR analýza dá negativní výsledek, tj. provádění této analýzy v tomto období je také nevhodné, stejně jako v příliš raných stádiích onemocnění.

Je třeba říci, že přesné výsledky tohoto typu laboratorního výzkumu jsou možné pouze v případě primární infekce a absence virionů jiných virů.

Nyní k enzymatické imunoanalýze na virus Epstein-Barrové. Má stejné požadavky. Přítomnost herpes viru typu 5 nebo 6, toxoplazmózy a HIV infekce v těle může zkreslit výsledek stejně jako nedbalý přístup k analýze nebo nízká kvalita použitých činidel. V tomto případě mohou být vyžadovány další studie s ohledem na možné patogeny.

Normální výsledky testů, které naznačují nepřítomnost viru v těle, se považují za negativní výsledek všech 4 testů: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA a IgG EBNA. Ano, každý test se provádí samostatně, protože antigeny se objevují v různých obdobích onemocnění. Někdy mohou být předepsány pouze jednotlivé testy, ale ve většině případů je nutné provést všechny 4 testy, ale v různých obdobích onemocnění.

Například během inkubační doby onemocnění, stejně jako při absenci infekce, se v krvi neprokazuje žádný ze 4 typů protilátek. Takový výsledek nelze považovat za dostatečný, protože neumožňuje odlišit osobu, která onemocněla poprvé, od zdravé osoby.

Na začátku vývoje primárního onemocnění se v krvi objevují pouze protilátky IgM proti VCA. V raných stádiích onemocnění se k nim přidávají IgG VCA.

Akutní stadium primární infekce probíhá tvorbou tří typů protilátek: IgG VCA, IgM VCA a IgG EA, přičemž největší počet IgG protilátek je detekován proti kapsidovému antigenu. Stejné složení protilátek se udržuje po dobu šesti měsíců po akutní fázi onemocnění, ale množství IgM VCA postupně klesá na nulu.

Šest měsíců po onemocnění se v krvi objevují protilátky IgG proti EBNA, zatímco imunoglobulinů IgG proti EA je stále méně a IgM proti VCA zcela chybí.

V chronických případech onemocnění nebo reaktivace viru se mohou objevit různé ukazatele. Nejčastěji se v krvi nacházejí všechny 4 typy protilátek. Je však docela dobře možné, že imunoglobuliny IgM VCA a IgG EBNA nejsou detekovány.

Komplikace virové infekce nádorovými procesy nastává při absenci protilátek IgM VCA a imunoglobuliny IgG EBNA nejsou ve všech případech detekovány.

Enzymový imunotest však určuje nejen přítomnost určitých protilátek, ale také jejich koncentraci, což nám umožňuje s větší přesností posoudit stádium patologie a její možné důsledky. Není třeba zde hovořit o konkrétních číslech. Koneckonců, každá laboratoř provádí analýzu jedním z možných způsobů s použitím různých činidel, takže výsledky analýzy různých laboratoří se mohou v digitálním formátu lišit.

Pacientovi je nutné vystavit formulář s uvedením prahových (referenčních) hodnot. Pokud je výsledek pod prahovou hodnotou, je považován za normální (negativní) ukazatel. Pokud je zjištěné číslo nad referenční hodnotou, vše naznačuje pozitivní výsledek, což znamená, že virus v těle žije. Hodnota zjištěné hodnoty udává stadium onemocnění a kolonizaci těla viry EBV, tj. závažnost patologie.

Pokud je ELISA test negativní, znamená to pouze, že daná osoba v minulosti nepřišla do kontaktu s virem EBV. Nelze však s jistotou říci, zda je virus v těle v současné době přítomen. Negativní výsledek může být způsoben inkubací patogenu v těle a asymptomatickým nosičstvím viru. Někdy je nutné po určité době provést druhou sérii testů, aby se zajistilo, že v těle není virus.

Pokud výsledek testu ELISA na virus Epstein-Barrové jen mírně překračuje referenční hodnoty, je výsledek považován za sporný. Příčinou je nejčastěji časné stádium onemocnění nebo přítomnost virionů jiného viru v těle. V tomto případě se po 2 týdnech doporučuje provést opakovaný test na EBV a případně i na další patogeny.

[ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]

Pokud jde o otázku, jak dlouho trvá provedení testu na virus Epstein-Barrové a kdy můžete očekávat výsledky, neočekávají se žádné zvláštní obtíže. V seriózní, dobře vybavené laboratoři budete muset po odeslání biomateriálu čekat maximálně 2 dny. V situacích vyžadujících urgentní analýzu lze odpověď získat i po několika hodinách.

Test na virus Epstein-Barrové by měl být proveden v důvěryhodné laboratoři, kde jsou k dispozici jak kvalitní činidla, tak kvalifikovaní specialisté. Koneckonců, test stojí peníze (a ne malé, test na jeden typ protilátek stojí asi 150-170 UAH) a nechtěl bych dostat falešný výsledek a pak se případně obrátit znovu, ale do jiné laboratoře, na opakovaný test.

[ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ]