Mikrobiologická analýza mozkomíšního moku

Mikrobiologický výzkum

Mikroskopie obarveného nátěru mozkomíšního moku umožňuje identifikovat mikrobiální flóru u 10–20 % pacientů s bakteriální meningitidou. U bakteriální meningitidy lze detekovat meningo- a fazolovité diplokoky umístěné intracelulárně v cytoplazmě neutrofilů nebo pneumokoky, které jsou také diplokoky, ale mají trojúhelníkový tvar a dvojice koků tvoří kosočtverec (pokrytý kapslí, umístěný extracelulárně). V některých případech jsou vizuálně detekovány spirochety, tyčinkovité bakterie a kvasinkové houby. Data získaná mikroskopií jsou přibližná a jsou potvrzena jinými metodami. K detekci mykobakterií tuberkulózy se používá flotační metoda. Pro izolaci kultury patogena se mozkomíšní mok vyseje na živná média. Výsledky studie závisí na správném odběru a transportu mozkomíšního moku, kvalitě živných médií. Četnost izolace kultury patogena je dvakrát vyšší, pokud pacient před spinální punkcí nedostal antibakteriální léky. V praxi je možné izolovat kulturu patogenu z mozkomíšního moku u 30–50 % pacientů s hnisavou meningitidou. Stanovení citlivosti izolované kultury na antibakteriální léky používané k léčbě meningitidy (benzylpenicilin, ampicilin, oxacilin, ceftriaxon, pefloxacin, ciprofloxacin, vankomycin, rifampicin, gentamicin) je povinné. Plísňové kultury se testují na citlivost na antimykotika.

Hlavní pravidlo, na kterém jsou založeny mikrobiologické studie mozkomíšního moku, je, že počet vypěstovaných kolonií závisí na počtu vysetých mikroorganismů a jejich životaschopnosti v době vysetí. To znamená, že objem mozkomíšního moku odeslaného k mikrobiologickému vyšetření a rychlost jeho podání přímo ovlivňují výsledky studie. Obzvláště velké objemy tekutiny by měly být odesílány k vysetí v případě plísňových infekcí, protože koncentrace plísňových mikroorganismů v ní je extrémně nízká. Při vyšetření pacienta s chronickou meningitidou by tedy minimální objem mozkomíšního moku odeslaného k vysetí měl být 15-20 ml. Dalším pravidlem mikrobiologického vyšetření je povinné Gramovo barvení u akutní bakteriální meningitidy. Procedura barvení trvá přibližně 5 minut a má vysokou citlivost a specificitu. Výsledky tohoto barvení umožňují okamžitý výběr adekvátní antibakteriální terapie. Antibiotika podávaná před lumbální punkcí mohou poškodit bakteriální membrány a tím významně snížit specificitu Gramova barvení, ale i tehdy je užitečné. Kromě kultivace, Gramova barvení, barvení Mycobacterium tuberculosis a barvení indickým tušem na kryptokoky se používá řada sérologických testů na virové, bakteriální a mykotické antigeny. Pokud je tedy podezření na neurosyfilis, je třeba vyšetřit mozkomíšní mok a RIF.

Virologické metody

Izolace virové kultury se obvykle používá pouze pro vědecké účely.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]