Krevní test na přítomnost rakovinných buněk v těle: název, jak ho užívat

Dnes se medicína stále častěji setkává s onkologickými onemocněními. Navzdory širokému rozšíření rakovinných nádorů zůstává mechanismus jejich vzniku a šíření neprozkoumaný. Šíření onkologických onemocnění probíhá neuvěřitelnou rychlostí. Nejčastěji tato onemocnění postihují lidi v důchodovém věku. Pokud však dříve bylo toto onemocnění považováno především za onemocnění starší generace, dnes existuje tendence k jeho omlazení. K tomuto onemocnění jsou náchylní mladí lidé, teenageři a dokonce i malé děti. Nebezpečí spočívá v tom, že rakovinné nádory mohou postihnout naprosto jakýkoli orgán. Rostou a v určitém okamžiku se buňka odlomí, dostane se do jiné tkáně a přichytí se. V důsledku toho vzniká nový nádor (metastáza). Rozvoji nádorů a tvorbě metastáz lze zabránit, pokud je nádor včas odhalen a jsou přijata nezbytná opatření. Analýza rakovinných buněk hraje vedoucí roli v včasné diagnostice maligních nádorů.

Testy umožňují odhalit nádor, diagnostikovat ho a co je nejdůležitější, včas reagovat. V raných stádiích lze jeho rozvoji ještě zabránit. Nejčastěji jsou však nádory zjištěny v pozdních stádiích, kdy je často nemožné pacientovi pomoci. Obtížnost diagnózy spočívá v tom, že v raných stádiích se nádor vyvíjí téměř asymptomaticky a lze jej detekovat pouze při preventivním vyšetření nebo při laboratorních testech.

Jaké testy existují na rakovinné buňky?

Při vyšetření rakoviny se provádí obecné objektivní vyšetření pomocí různých instrumentálních metod a používají se také laboratorní testy. Nejprve jsou pacientovi předepsány standardní klinické testy. Z nich lze získat obecnou představu o procesech, které probíhají v těle. Zhoubné novotvary mohou být nepřímo indikovány zvýšeným počtem leukocytů a také zvýšením sedimentace erytrocytů (ESR). Tyto informace však nestačí, protože u jakéhokoli onemocnění, infekčního nebo zánětlivého procesu se tyto ukazatele také zvyšují. Rakovinu může také indikovat prudký pokles hemoglobinu, zejména pokud porovnáte ukazatele v dynamice. Pokud jsou takové příznaky zjištěny, je předepsána speciální studie zaměřená na detekci rakovinných buněk.

Provádí se rozšířený krevní test, během kterého se stanoví specifické onkologické markery. Tyto markery se tvoří okamžitě, a to i ve fázi tvorby nádoru. Umožňují proto identifikovat transformované buňky a rakovinné nádory v počátečních fázích jejich vzniku.

Princip diagnostické metody spočívá v tom, že speciální testovací systémy detekují v krvi nádorové markery produkované rakovinnými nádory. Čím závažnější je stádium onemocnění, tím vyšší je jejich koncentrace v krvi. Tělo zdravého člověka nádorové markery neprodukuje. Jejich přítomnost je tedy přímým potvrzením rakovinného nádoru. Na základě výsledků lze posoudit velikost nádoru, jeho typ a lokalizaci.

Indikace postupu pro analýzu nádorových buněk

Testování rakovinných buněk se provádí při podezření na rakovinu a také z preventivních důvodů pro včasnou diagnostiku rakovinných nádorů. Pravidelně by se měli testu podrobovat i lidé starší 50 let, stejně jako ti, kteří spadají do rizikové skupiny pro vznik rakovinných nádorů. Test se provádí při zjištění nádoru, jehož povaha není jasná. Umožňuje určit, zda je nádor benigní nebo maligní. Test se také provádí ke sledování dynamiky výsledků u pacientů s rakovinou a ke kontrole účinnosti léčby.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

Příprava

Analýza nádorových markerů nevyžaduje žádnou speciální přípravu. Jediné, co potřebujete, je doporučení od svého lékaře. Poté 2–3 dny před analýzou dodržujte lehkou stravu (nepijte alkohol, kořeněná, tučná, uzená jídla, koření). Analýza by se měla provádět nalačno. Poslední jídlo by mělo být 8 hodin před testem. Ráno nesmíte pít alkohol ani kouřit. Nepřetěžujte tělo několik dní a vyhýbejte se fyzické práci.

[ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Technika pro analýzu nádorových buněk

Existuje mnoho technik. Vše záleží na typu výzkumu. Pokud se provádí krevní test ke stanovení nádorových markerů, provádí se pomocí enzymově-imunoanalýzových metod. Tato metoda je založena na aglutinační reakci, během níž nádorový marker působí pro tělo jako cizí činidlo (antigen). Imunitní systém na něj okamžitě reaguje a produkuje protilátku. Působení protilátek je zaměřeno na zničení cizího organismu a jeho následné odstranění. Protilátka najde antigen, který je markerem rakovinného nádoru, napadne ho a stimuluje destrukci. Během tohoto souboje se antigen a protilátka spojí, dochází k aglutinační reakci. Tyto komplexy se detekují během analýzy, když se protilátky zavedou do krve.

Za tímto účelem se pacientovi odebere potřebné množství krve. Aby se zabránilo srážení, přidá se několik kapek heparinu. Poté se krev doručí do laboratoře. Tam se krev rozdělí na frakce. Krevní sérum se izoluje odděleně, protože v séru se nacházejí nádorové markery. K tomu se používá centrifugace. Pomocí speciálního zařízení - centrifugy se krev ve zkumavce otáčí vysokou rychlostí. V důsledku toho se všechny krevní elementy usadí na dně a zkumavka obsahuje pouze sérum. S ním se provádějí další manipulace.

Odebere se speciální analytická sada (ELISA), na dno buňky se přidá určité množství krevního séra. Přidá se speciální protilátka proti rakovinnému nádoru. Čeká se několik hodin. Pokud dojde ke komplexační reakci, během které se protilátky a antigeny spojí, pak se v krvi objeví antigen, který působí jako onkomarker indikující přítomnost rakovinného nádoru. Tvorbu komplexů antigen-protilátka lze pozorovat pouhým okem, protože se ve zkumavce objevuje zákal a sediment ve formě vloček. Stupeň zákalu lze použít k posouzení počtu onkomarkerů. Pro přesnost výsledků se však provádějí speciální měření. Používá se mezinárodní standard zákalu nebo spektrofotometr, který na základě úhlu lomu světla procházejícího roztokem určuje jeho koncentraci a poskytuje hotový výsledek.

Existuje i další metoda – imunomagnetická diferenciace krevních frakcí. K tomu se používá speciální zařízení, které umožňuje detekovat rakovinné buňky stanovením nádorových markerů, které se připojí k pozměněné buňce a stanou se viditelnými v magnetickém poli. Přesnost této metody je poměrně vysoká – i z milionu zdravých buněk lze detekovat jednu rakovinnou buňku.

S pomocí těchto analýz je také možné určit přesný počet rakovinných buněk, rychlost jejich šíření a předpovědět dynamiku růstu. Výhodou těchto analýz je také to, že umožňují sledovat průběh léčby, určovat účinnost terapie a také s vysokou přesností vybírat léky a jejich optimální dávkování. Přesnost dávkování během léčby hraje hlavní roli, protože umožňuje účinně bojovat s komplikacemi, snižovat počet rakovinných buněk a předcházet rozvoji metastáz. Kromě toho takové správné dávkování snižuje toxický účinek léků na organismus.

Existuje také metoda studia biopsie, při které se odebere kousek tkáně k vyšetření. Poté se provede cytologické a histologické vyšetření. Cytologická analýza zahrnuje přípravu mikropreparátu ze získaného vzorku tkáně pro další studium jeho vlastností pod mikroskopem. Studují se hlavní morfologické a anatomické vlastnosti. Mikropreparát ze vzorku zdravé tkáně se výrazně liší od mikropreparátu z rakovinného nádoru. Existují určité rozdíly ve struktuře, vzhledu a probíhajících intracelulárních procesech. Speciální inkluze mohou také naznačovat rakovinný nádor.

Během histologického vyšetření se tkáň vyseje na speciální živná média určená pro pěstování tkáňových kultur. Výsev se kultivuje za speciálních podmínek po dobu 7 dnů, po kterých se sleduje charakter růstu nádoru, jeho rychlost a směr. To má důležitý diagnostický význam.

Krevní test na rakovinné nádory

Nejrychlejším způsobem, jak zjistit onkologické onemocnění, je provedení krevního testu. Takový test se provádí během 1-2 dnů a v případě potřeby lze urgentní výsledky získat do 3-4 hodin. Jedná se o expresní metodu, která stále vyžaduje další objasňující vyšetření. To však zcela postačuje k získání předběžné diagnózy a přesné identifikaci nádoru. Analýza umožňuje určit i přesnou lokalizaci nádoru a stádium onkologického procesu.

Jako testovací materiál slouží pacientova krev. Analýza se provádí ráno nalačno. Slouží především k potvrzení nebo vyvrácení diagnózy a umožňuje odlišit benigní nádor od maligního. Používá se také k dynamickému sledování ukazatelů za účelem stanovení účinnosti léčby, sledování stavu nádoru a prevence relapsů.

Princip metody spočívá ve stanovení hlavních antigenů, které jsou produkovány rakovinnými buňkami během vývoje nádoru. Pokud jsou detekovány, je možné s jistotou říci, že osoba má rakovinu. Pokud však takové nádorové markery nejsou detekovány, negativní výsledek se neuděluje. V tomto případě jsou předepsány další studie.

Lokalizaci nádoru lze určit typem nádorového markeru. Pokud je v krvi pacienta detekován antigen CA19-9, může to znamenat rakovinu slinivky břišní. Marker CEA indikuje lokalizaci nádoru ve střevech, játrech, ledvinách, plicích a dalších vnitřních orgánech. Pokud je detekován CA-125, indikuje to onkologický proces ve vaječnících nebo přívěscích. Markery PSA a CA-15-3 indikují rakovinu prostaty a rakovinu prsu. CA72-3 indikuje rakovinu žaludku a rakovinu plic, B-2-MG indikuje leukémii, leukémii, myelom. ACE se objevuje u rakoviny jater a metastáz. Krevní test není jediným faktorem potvrzujícím metodu. Měl by být používán v kombinaci s mnoha dalšími faktory.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ]

Test buněk rakoviny děložního čípku

Buňky rakoviny děložního čípku lze identifikovat pomocí krevního testu, jehož cílem je identifikovat onkomarker. V takových případech se zpravidla detekuje CEA neboli karcinoembryonální antigen. K testování se také odebere stěr z pochvy a děložního čípku. Nejprve se provede předběžné cytologické vyšetření. Během cytologické analýzy lze detekovat transformované buňky a specifické inkluze, které naznačují onkologické procesy.

Poté se v případě potřeby provede biopsie, při které se odebere kousek tkáně k vyšetření. Ten se zaseje na živná média, inkubuje se a poté se studují hlavní morfologické a biochemické vlastnosti. Na základě získaných údajů se vyvozuje závěr o povaze nádoru, stupni jeho vývoje a koncentraci rakovinných buněk.

[ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]

Test na karcinoembryonální antigen

Jedná se o antigen používaný k diagnostice a léčbě rakoviny žaludku, střev, konečníku, ženských reprodukčních orgánů a mléčných žláz. U dospělých je v malém množství produkován průduškami a plícemi a nachází se v mnoha biologických tekutinách a sekretech. Jeho množství, které v onkologii prudce stoupá, je indikátorem. Je třeba vzít v úvahu, že jeho množství může být zvýšené i u lidí trpících autoimunitními onemocněními, tuberkulózou, benigními nádory a dokonce i u kuřáků. Proto je detekce vysoké koncentrace těchto markerů (20 ng/ml a více) pouze nepřímým potvrzením rakoviny a je nutné provést řadu dalších studií. Tento ukazatel by měl být také dynamicky sledován, aby bylo možné vyvodit úplné závěry. Jako výzkumný materiál slouží žilní krev. Antigen se detekuje v krevním séru.

[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ]

Analýza mutací rakovinných buněk

Receptor epidermálního růstového faktoru je transmembránový receptor, který interaguje s extracelulárními ligandy epidermálních růstových faktorů. Podílí se na tvorbě rakovinných nádorů mnoha orgánů, zejména je spolehlivým znakem rakoviny plic. Faktem je, že hlavní geny jsou obvykle zaměřeny na zajištění kontroly nad růstem a reprodukcí tělesných buněk. Buňky rostou, reprodukují se do určitého limitu, po kterém gen vydá signál k zastavení další reprodukce a buňky se přestanou dělit.

Gen také řídí proces apoptózy – včasné smrti starých, zastaralých buněk. Když dojde k mutacím v genech, přestanou kontrolovat reprodukci (proliferaci) a smrt (apoptózu) a vydávají signál k neustálému růstu, v důsledku čehož buňky rostou neomezeně a neustále se nekontrolovatelně dělí. To vede ke vzniku rakovinného nádoru, který se vyznačuje schopností neomezeného růstu. Ve své nejprimitivnější formě si lze rakovinu představit jako nekontrolované dělení a nesmrtelnost buňky. Tento proces je také považován za neschopnost buňky včas zemřít.

Chemoterapie a různé protinádorové léky jsou zaměřeny konkrétně na zničení a inaktivaci tohoto genu. Pokud lze jeho aktivitu potlačit, lze zastavit rozvoj rakoviny. Během mnoha let léčby těmito cílenými léky se však gen, stejně jako každý organismus, adaptoval a stal se rezistentním vůči řadě léků.

Poté byly léky vylepšeny, jejich složení se změnilo, opět se staly aktivními ve vztahu k tomuto genu. Ale i samotný gen se vylepšil: opakovaně mutoval a pokaždé si vyvinul rezistenci na léky. V průběhu let se nahromadilo mnoho typů mutací tohoto genu, přes 25. To s sebou nese neúčinnost specifické terapie. Aby se neztrácel čas marnou léčbou, která nebude účinná, provádí se analýza, která určí mutaci tohoto genu.

Například detekce mutací v genu KRAS naznačuje, že léčba rakoviny plic a tlustého střeva inhibitory tyrozinkinázy bude neúčinná. Pokud jsou detekovány mutace v genech ALK a ROS1, naznačuje to, že by měl být předepsán crizotinib, který tento gen rychle a účinně inhibuje a zabraňuje dalšímu rozvoji nádoru. Gen BRAF vede ke vzniku melanomových nádorů.

Dnes existují léky, které dokáží blokovat aktivitu tohoto genu a změnit jeho nastavení na neomezený růst. To vede ke zpomalení růstu nádoru nebo jeho zastavení. V kombinaci s protinádorovými léky lze dosáhnout významných výsledků v léčbě, a to až po zmenšení velikosti nádoru.

[ 37 ], [ 38 ], [ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ]

Analýza stolice na rakovinné buňky

Podstatou analýzy je obvykle detekce skryté krve ve stolici. Tento příznak může naznačovat přítomnost onkologického procesu v tlustém střevě nebo konečníku. Lidé starší 45-50 let, kteří jsou nejvíce ohroženi rozvojem rakovinných nádorů, by měli tento test absolvovat každoročně. Může to naznačovat další patologie, ale pak jsou pro diferenciální diagnostiku nutná další vyšetření. Jedná se o časnou diagnostickou metodu, která umožňuje odhalit nádor ve stádiu jeho vzniku a přijmout opatření k léčbě. Často tato metoda dokáže odhalit i prekancerózní stav.

Biopsie rakovinných buněk

Jedná se o vyšetření, které poskytuje nejpřesnější a nejspolehlivější výsledky. Skládá se ze dvou fází. V první fázi se odebírá biologický materiál k dalšímu vyšetření. Materiál je kousek tkáně odebraný přímo z orgánu, ve kterém se nádor nachází. Lékař ve skutečnosti pomocí speciálního vybavení a nástrojů odřízne kousek nádoru a odešle jej do laboratoře k dalšímu vyšetření. Odběr se obvykle provádí v místním znecitlivění.

Ve druhé fázi probíhá další cytologické a histologické vyšetření biologického materiálu. Během cytologického vyšetření se připraví mikropreparát, který se vyšetří pod mikroskopem. Na základě celkového obrazu, vzhledu a povahy inkluzí lze učinit předběžný závěr o tom, zda je nádor benigní nebo maligní. Tato fáze nepřesahuje 30 minut.

Poté se tkáň namočí a zaseje do speciálního živného média, které obsahuje všechny podmínky pro růst buněk. Kultura se umístí do optimálních podmínek, do inkubátoru, a uchovává se po dobu jednoho měsíce. Studie je poměrně dlouhá a je určena rychlostí růstu buněk. Pokud se jedná o rakovinný nádor, začne aktivně růst. Benigní, nezhoubný nádor neroste. Pro urychlení růstu lze přidat růstové faktory, které dále stimulují růst nádoru. V tomto případě lze výsledky získat do 7-10 dnů.

Vzrostlý nádor je podroben dalším biochemickým, mikroskopickým studiím a nakonec je výsledek uveden ve formě konečné diagnózy, která určuje typ nádoru, jeho stádium, prevalenci a směr růstu nádoru. Toto je obvykle konečná verze, která určuje výsledek se 100% přesností.

[ 43 ], [ 44 ], [ 45 ], [ 46 ]

Normální výkon

Pokud se provádí analýza za účelem stanovení nádorových markerů, je poměrně snadné ji rozluštit. V přítomnosti onkologického onemocnění se v těle nacházejí nádorové markery. Ve zdravém těle žádné nádorové markery neexistují, protože jsou produkovány pouze rakovinnými buňkami. Výjimkou je rakovinný embryonální antigen, který je v těle normálně přítomen v minimálním množství. Mírné zvýšení koncentrace může naznačovat různé somatické patologie a pouze prudké zvýšení nad 20 ng/ml naznačuje přítomnost rakovinného nádoru. Kromě toho lze podle toho, který antigen je detekován, posoudit lokalizaci nádoru. Každý orgán produkuje svůj vlastní typ markerů.

Dešifrování výsledků biopsie je ještě snazší. Pokud je na živném médiu pozorován buněčný růst, je nádor maligní; pokud není pozorován žádný růst, je benigní.

Norma testu rakovinných buněk

Neexistují jednoznačné indikátory pro všechny typy rakoviny. Každý specifický nádorový marker má své vlastní normální hodnoty. Navíc se výrazně liší v závislosti na věku a fyziologických charakteristikách dané osoby.

Obecně lze prezentovat následující ukazatele:

• 0-1 ng/ml – normální;
• 1–20 – benigní nádor, prekancerózní stav, somatické patologie;
• 20-30 – rakovinný nádor;
• Nad 30 – metastázy.

Je důležité si uvědomit, že jakýkoli nádor, i benigní, se může vyvinout v maligní. Absence nádorových markerů ne vždy znamená nepřítomnost rakoviny. To je důvod k dalšímu výzkumu.

[ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]

Zařízení pro analýzu

Pro provedení analýzy je zapotřebí komplexní technologické laboratorní vybavení. Pro detekci nádorových markerů jsou potřeba speciální soupravy pro enzymový imunotest, laboratorní sklo, dávkovače, mikropipety, centrifuga, inkubátor, kultivátor, spektrofotometr nebo hmotnostní spektrometr pro měření optické hustoty a imunomagnetický separátor.

Pro cytologické, mikroskopické a histologické vyšetření je zapotřebí mikroskop s vysokým rozlišením. Pro histologii je zapotřebí parní lázeň, autokláv, suchý ohřívač, termostat, inkubátor, exsikátor a digestoř.

Jak dlouho trvá testování na rakovinné buňky?

Detekce nádorových markerů je expresní metoda, která umožňuje získat předběžné výsledky a potvrdit nebo vyvrátit diagnózu. Provádí se poměrně rychle - 1-2 dny, v případě potřeby se může zrychlit na 3-4 hodiny.

Nejspolehlivější a nejpřesnější analýzou rakovinných buněk je biopsie, která umožňuje definitivní diagnózu. Taková analýza se provádí od 14 do 28 dnů (v závislosti na rychlosti růstu buněčné kultury). V případě potřeby lze urychlit na 7–10 dnů vytvořením speciálních inkubačních podmínek a přidáním růstových faktorů.