Imunohistochemické markery v diagnostice prekanceróz ústní sliznice a červeného okraje rtů

Včasná a účinná diagnóza neoplastických lézí ústní sliznice (CRS) a červeného okraje (CCG) zůstává vážným problémem onkostomatologie. Squamous cell carcinoma ústní dutiny zaujímá šesté místo na světě v frekvenci mezi zhoubnými nádory všech lokalizací. V Ruské federaci je výskyt maligních novotvarů ústní dutiny 2 až 4% z celkového počtu maligních nádorů člověka.

Struktura onemocnění sliznice ústní dutiny v posledních letech prošla významnými změnami, zejména zvýšením podílu prekancerózních onemocnění. Z tohoto hlediska zůstává efektivní neinvazivní detekce příznaků malignity naléhavým úkolem zubního lékařství.

I přes zdánlivou jednoduchost klinického zobrazovacího prediktor změn sliznice dutiny ústní a CGC v souvislosti s externím lokalizace, určení nozologických pre-rakovinných, pouze na základě Otisk a pohmatem, často vedou k diagnostickým chyby byly různé stupně keratinizace nebo vředů i markornyh prvky porážka je obtížně rozlišuje. Zvlášť těžké včasná diagnóza malignity, protože se objeví její klinické projevy o něco později skutečně došlo maligní transformaci.

Výzkum V.P. Kharchenko a kol. Ukazuje se, že více než 2/3 pacientů v době léčby v léčebně a stanovení diagnózy mají III-IV stadia onemocnění. Jedním z důvodů pro pozdní léčbu je "rozmazání" klinického obrazu v počátečních fázích onemocnění. Kromě toho byla prokázána potřeba provést organizační a metodickou práci a zvýšit úroveň znalostí zubních lékařů o raných klinických projevech prekancerózních onemocnění ústní sliznice. Z provedených testů vyplynulo, že pouze 42,8% zubních lékařů odliší včasné projevy rakoviny ústní, přičemž 4,2% respondentů může správně provádět primární diagnostická opatření pro detekci rakoviny této lokalizace.

Procento nevyléčitelných forem rakoviny ústní sliznice v důsledku diagnostických chyb, podle různých autorů, dosahuje 58,4-70%. Situaci komplikuje nevyřešenými otázkami klinickou diagnózou pre-rakovinných, zejména potíže s rozlišením začátek zhoubného bujení, stejně jako problém výběru způsobu léčby rakovinových onemocnění. Neexistují žádné absolutní a relativní náznaky biopsie, zvláště ve stádiích konzervativní léčby. K dnešnímu dni není v literatuře žádný příklad diagnostického kritéria klinické úrovně, na kterou by se zubař mohl při výběru vhodné metody pro léčbu určitého před nádorem léčit.

Řešení diagnostických problémů, které většina autorů vidí v pomocných diagnostických metodách (cytologie, cheilostomatoskopie, biomikroskopie, optická koherentní tomografie). Tyto metody jsou však spíše subjektivní, protože nesou pouze popisný charakter kvalitativních změn v postižených tkáních. Jedním ze způsobů kvantifikování morfologických změn je stanovení imunohistochemických markerů.

Zavedení moderních morfologických metod ověření nádorů do moderní praxe výrazně zlepšilo kvalitu diagnostiky a léčby maligních nádorů. Metodické možnosti moderní molekulární onkologie rozšířeny v současné době pomocí imunohistochemických studií může určit nejen histologické diagnózy nádoru, ale také k jejímu morphofunctional vlastnosti, pokud jde o agresivity a prognózy ve vztahu k prekancerózních lézí a rakoviny již vyvinula.

Podle moderních myšlenek je základem maligní transformace buněk aktivace jednotlivých nebo více buněčných onkogenů nebo supresorových genů. Je pozorována u 30% rakoviny karcinomu u lidí a v mnoha případech může být detekována imunohistochemicky. Byly studovány onkogeny ras p21, HER2 / neu, bcl-2 a supresorové geny p53 a Rb v různých nádorech. Některé z uvedených onkogenů (a supresorových genů) jsou nezávislé prognostické a prediktivní znaky.

Epitelem ústní sliznice je lokální praedifekce vzniku nádorových nádorů. Vnější faktory (traumatické okluze místa, ostré hrany výplně úpadku ortopedické konstrukce, nerozumný individuální pro ústní hygienu, zánětlivé a destruktivní periodontální léze), spolu s genetickými (dědičné) faktory mohou hrát roli při vyvolání rakoviny této lokalizaci. Při vývoji spinocelulárního karcinomu ústní poranění sliznice mohou být zapojeny do mechanismu řízení procesů epiteliální hyperplazie a skvamózní metaplazie.

Morfologické vlastnosti ústní sliznice epitelu během malignity související se změnou v sadě diferenciaci (fenotypu cytokeratin zejména epiteliální vrstvě) markery CEA exprese, stejně jako proliferaci markeru Ki - 67.

P53 - nádorový gen - supresorový protein, produkt, který je nukleární transkripční faktor, s mnoha funkcemi, včetně blokování průchodu buněk na buněčného cyklu a indukce apoptózy. Protein p53 je exprimován ve všech buňkách těla. Při neexistenci poškození genetického přístroje je protein p53 v neaktivním stavu a když dojde k poškození DNA, aktivuje se DNA. Aktivace spočívá v získání schopnost vázat se na DNA a aktivovat transkripci genů, které obsahují regulační oblast nukleotidové sekvence, která je označena prvek p53-odpověď. Mutace p53 v buňkách dochází asi 50% rakoviny, vede k syntéze proteinů se ztrátou svých funkcí, ale mají vysokou stabilitu a akumulaci v jádře, která imunohistochemicky vyjádřený v zřetelný nukleární barvení.

"Rozvětvený" typ wt-53 oncosuppressor genu a protein p53, který je kódován, hrají ústřední roli ve vývoji apoptózy. Když je DNA poškozena, dochází k expresi genu wt53 a odpovídajícího proteinu. Poslední blokuje buněčný cyklus v G1-S fázi, a tak inhibují další replikaci poškozené DNA, který je syntetizován v S fázi, a vytváří podmínky pro odstranění poškozené oblasti a udržování jeho modifikované části. Pokud dojde k opravě, buňka se dále rozděluje a generuje zdravé buňky. Nicméně, pokud nedojde k opravě, pak jsou zahrnuty i další mechanismy, které zajišťují destrukci takové buňky poškozenou (mutagenní) DNA, tj. E. Genetický program buněčné smrti se vyvíjí - apoptóza.
V posledních letech bylo navrženo, že stav p53 může být rozhodujícím faktorem určujícím citlivost nádoru na chemoterapii a radioterapii. Potvrzení této hypotézy jsou četné studie, dokazující, že mutovaný p53 je faktor špatné prognózy a neúčinnost adjuvantní terapie v různých nádorů ústní sliznice.

Markery proliferace jsou také vysoce informativní diagnostickou hodnotou při předpovědi průběhu maligních nádorů. Proliferační aktivita je hlavním faktorem jak v mechanismu maligní transformace buněk, tak v biologickém chování již se objevujících nádorů. Slibným markerem proliferační aktivity je antigen Ki-67, který je exprimován prakticky ve všech fázích buněčného cyklu a odpovídajícím způsobem odráží velikost proliferativní populace. Gen kódující Ki-67 je umístěn na dlouhém ramene chromozomu 10. Ki-67 se týká regulačních proteinů. Jeho vzhled se shoduje s vstupem buňky do mitózy, která ji umožňuje použít jako univerzální marker proliferace při hodnocení růstu maligních nádorů.

Řada studií zkoumajících diagnostickou hodnotu imunohistochemických markerů v předpovídání toku prekancerózní léze sliznice dutiny ústní a nachové linie. Murti PR et al. Studoval výraz p53 s červeným paušálním SSRI. Když byla stanovena imunohistochemická metoda, exprese p53 nezjistila maligní stav prekanceru ústní sliznice. Autoři navrhli, že nadměrná exprese p53 špičce v blízkosti době transformace do prekancerózní rakoviny, a nemohou být použity jako časný marker malignity predikce pre-rakovinných ústní sliznice. Jiní výzkumníci zjistili, že lidský gen TP53 kóduje alespoň 9 různých isoforem. Další člen rodiny p53, p63, obsahuje 6 různých izoforem a hraje klíčovou roli ve vývoji ústní sliznice, slinných žláz, zubů a kůže. Bylo navrženo, že p63 je spojen s vývojem karcinomu dlaždicových buněk hlavy a krku. Nicméně žádné statisticky významné změny v expresi nových isoforem p53 a p63 v prekanceru SSRI nebyly pozorovány ve srovnání s nemodifikovaným tkáním. Studie od společnosti De Sousa FA potvrdila prognostický význam markeru p53 při určování potenciálu maligní transformace prekanceru ústní sliznice. Současně se někteří autoři domnívají, že p53 nelze použít jako jediný marker pro předpovědi vývoje rakoviny.

Stejně slibný prognostický Imunohistochemická detekce rovina je zastoupena v studovaného vzorků tkáně podoplanina - integrální membránový mukoprotein vyjádřená jako nezměněný a změněná zánětlivé a neoplastické endotelu lymfatických kapilár. Vědci našli statisticky významný vztah expresní podoplanina iABCG2 (ATP-vázající protein podskupina G2) s rizikem maligní transformaci lichen planus (riziko významně vyšší při Koexprese podoplanina a ABCG2, než bez Koexprese podoplanina a ABCG2), a dospěl k závěru, že podoplanin a ABCG2 mohou být použity jako biomarkerů pro vyhodnocení rizika maligní transformace se prekancerózní léze RBCU

Výzkum zahraničních vědců potvrdil diagnostický význam exprese Fas / FasL jako biomarkerů vývoje rakoviny. Fas je typ I transmembránového glykoproteinu (synonyma APO-I, CD95), a indukuje apoptózu v buňkách po interakci s ligandem Fas (FasL) nebo agonistické monoklonální protilátky proti Fas.

Současně je známo, že Fas je exprimován prakticky ve všech typech tkání. Zvýšená exprese Fas je pozorována u ledvin, jater, srdce a brzlíku. Kromě toho je tento receptor exprimován na mnoha nádorech, stejně jako buňky infikované virem. Důvodem rezistence různých buněčných typů na apoptózu závislou na Fas může být zvýšení produkce rozpustných Fas těmito buňkami. Rozpustný Fas je produkt alternativního sestřihu a je schopen inhibovat apoptózu indukovanou agonistickými monoklonálními protilátkami proti Fas nebo FasL.

Tak nejednoznačné interpretace výsledků výzkumu provádí různými autory vede k závěru, že v tomto stádiu molekulární onkologie použití imunohistochemického markeru perspektivně v kombinaci s jinými metodami diagnózu a prognózu premaligních lézí sliznice dutiny ústní.

Zvláštní význam má problém zařazení imunohistochemických markerů pro diagnostický význam. Věříme, že v sestupném pořadí mohou být uspořádány v následujícím pořadí:

1. Imunohistochemické markery s vysokým diagnostickým významem: subplanin, ABCG2, bcl-2;
2. Imunohistochemické markery s průměrným stupněm diagnostické významnosti: Bax, MMP-9;
3. Slibné imunohistochemické markery, jejichž diagnostická významnost vyžaduje další studium: MMP-2, MT1-MMP, Fas / FasL;
4. Imunohistochemické markery, jejichž diagnostická významnost předpovídá průběh prekancerózních onemocnění, není prokázána: p53, p63.

Na základě této analýzy literatury dat je možné učinit závěr, že stanovení imunohistochemických markerů by neměla být považována za jediný způsob predikce průběh prekancerózní léze sliznice dutiny ústní a identifikace riziko maligní transformace, ale přesto má tato metoda vysokou diagnostickou hodnotu v kombinaci s jinými základě metody predikce průběhu prekancerózních onemocnění.

Výzkumný pracovník Kuznetsova Roza Gilevna. Imunohistochemické markery v diagnostice prekancerózních lézí sliznice ústní a červeného okraje rtů // Praktická medicína. 8 (64) Prosinec 2012 / svazek 1

[1], [2], [3], [4], [5]