Testy na lidský papilomavirus: jak se provádějí, dekódování

Lidský papilomavirus představuje vážnou hrozbu. Diagnostika je nezbytná k určení kmene infekce a rizika její onkogenicity. Tyto informace nám umožňují vytvořit nejvhodnější a nejúčinnější léčebný plán.

Vysoce kvalitní diagnostiku provádí několik specialistů současně. Hlavní indikace pro vyšetření těla jsou:

• Aktivní sexuální život a častá změna sexuálních partnerů.
• Svědění, pálení v oblasti genitálií, atypický výtok.
• Výskyt nových výrůstků na kůži a sliznicích ve formě papilomů, bradavic a kondylomů.

Diagnóza papilomaviru se skládá z komplexu laboratorních a instrumentálních metod:

• Vizuální vyšetření a sběr anamnézy – lékař vyšetří postižené oblasti a ptá se, kdy se poprvé objevila vyrážka nebo jiné příznaky HPV. Posoudí typ a tvar novotvarů. Pokud jsou přítomny anogenitální výrůstky, provede se vyšetření děložního čípku a uretroskopie.
• Cytologie stěrů a šrotů – provádí se za účelem zjištění morfologických změn na buněčné úrovni spojených s HPV. Přesnost této metody závisí na technice odběru materiálu a kvalifikaci laborantů.
• Kolposkopie je vyšetření sliznice k detekci subklinických forem infekce. Diagnóza je potvrzena přítomností následujících faktorů: leukoplakie, mozaika, punkce, zóna abnormálních transformací.
• Biopsie je odběr malého množství postižené tkáně k mikroskopickému vyšetření. Obvykle se provádí při podezření na postižení děložního čípku.
• Histologické vyšetření – materiál získaný biopsií se odesílá k laboratornímu vyšetření k identifikaci prekancerózních stavů a dalších buněčných abnormalit.
• PCR – provádí se k identifikaci jednotlivých typů HPV. K diagnostice se používá krev, moč, hlen a další tkáňové tekutiny.
• Digene test je jednou z nejspolehlivějších diagnostických metod. Má vysokou citlivost na lidský papilomavirus. Umožňuje určit genotyp a jeho příslušnost k vysoce onkogenní nebo nízko onkogenní skupině.

Dnes existuje mnoho metod, které umožňují detekovat HPV infekci a určit stupeň její agresivity.

Screening na lidský papilomavirus

Povinným testem pro pacienty s predispozicí k maligním procesům v těle je screening. Lidský papilomavirus je také důvodem k podstoupení tohoto laboratorního testu.

První screening se doporučuje ženám ve věku 30 let. Analýza je nezbytná nejen k detekci papilomaviru, ale také k prevenci erozivních lézí děložního čípku spojených s HPV.

Nejčastěji jsou pacientům předepsány následující typy screeningu:

• Cytologický PAP test – k vyšetření se používá cervikální seškrab umístěný v tekutém médiu. Pomáhá identifikovat onkologické kmeny HPV v rané fázi vývoje.
• Rozšířená – identifikuje genotypy s vysokou onkogenitou a jejich koncentraci v těle.
• Polymerázová řetězová reakce má vysokou diagnostickou hodnotu, protože umožňuje identifikovat všechny typy lidského papilomaviru.

Screening HPV se provádí jak během diagnózy onemocnění, tak i během terapie a za účelem vyhodnocení výsledků léčby.

Test na lidský papilomavirus

Pokud existuje podezření na papilomavirus, všem pacientům je předepsán soubor diagnostických postupů. Analýza HPV je stanovení typu viru v laboratorním prostředí. Pro studii se používají různé biologické tekutiny a tkáně.

Nejčastěji se k analýze odebírá stěr z genitálií. Odběr materiálu z této oblasti je nutný i při absenci vizuálních příznaků papilomatózy. Výsledná biopsie se vyšetřuje pod mikroskopem na přítomnost epiteliálních buněk pozměněných virem. Na základě diagnostických výsledků se určí typ infekce a riziko její onkogenicity.

Při plánování těhotenství je povinné provést test na papilomatózní infekci, aby se zjistily příčiny neplodnosti a patologie těhotenství. V tomto případě je test předepsán oběma partnerům najednou. To je dáno tím, že virus se přenáší během intimního kontaktu. Na základě výsledků studie může lékař předepsat další diagnostické metody a sestavit léčebný plán.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Kvantitativní analýza lidského papilomaviru

Pro detekci papilomaviru, určení jeho typu a stupně aktivity se provádí kvantitativní analýza. Existuje několik metod pro stanovení HPV, zvažme je:

1. Polymerázová řetězová reakce – PCR je standardem pro diagnostiku HPV. Analýza je založena na zvýšení počtu kopií virové DNA v biopsii. Tato metoda umožňuje detekci i jednotlivých typů viru s vysokou přesností.
2. Digene test – zvláštností této metody je spolehlivá detekce genotypů se zvýšenou onkogenitou. K analýze se používají různé biologické tekutiny a materiály.
3. Stanovení přítomnosti virových protilátek - analýza odhaluje specifické proteiny imunitního systému. Každý virový agens, který vstoupí do těla, podporuje produkci jedinečných imunoglobulinů. Pokud jsou v krevním séru detekovány protilátky proti lidskému papilomaviru, naznačuje to infekci těla.

Pro provedení kvantitativní analýzy se používá kapilární krev (z prstu), seškrab z kůže a sliznic a biopsie tkání. 12 hodin před provedením testů byste měli přestat užívat antimykotika, antivirotika, antimikrobiální a další léky, včetně antikoncepce. V den diagnózy je třeba se osprchovat a důkladně si umýt intimní partie, pokud z nich byly odebrány seškrabky. Také 2–3 dny před zákrokem byste se měli zdržet pohlavního styku.

Ošetřující lékař interpretuje získané výsledky. Lékař bere v úvahu nejen data provedené diagnostiky, ale také klinické projevy onemocnění. V opačném případě mohou být výsledky interpretovány nesprávně.

DNA lidského papilomaviru, PCR

Jednou z nejběžnějších a nejspolehlivějších metod pro detekci DNA lidského papilomaviru je PCR. K provedení polymerázové řetězové reakce se používají různé biologické materiály: krev, moč, stěry ze sliznice, plodová voda. Analýza umožňuje zjistit přítomnost infekce, i když je v těle latentní.

Princip této diagnostické metody je založen na izolaci lidské a virové DNA. Jakákoli deoxyribonukleová kyselina se skládá ze čtyř nukleotidů:

• A – adenin.
• T – thymidin.
• G – guanin.
• C – cytosin.

Podle pravidel genetiky mají určité pořadí kombinací: A+T, G+C. Všechny živé organismy mají svou vlastní DNA, kterou lze izolovat. PCR rozpoznává fragmenty patogenní DNA, a tím izoluje patogen.

Výhody PCR:

1. Univerzálnost – kromě lidského papilomaviru lze během studie detekovat mnoho dalších patogenů infekčních onemocnění.
2. Vysoká citlivost – kromě určení přítomnosti viru metoda určuje jeho typ a další charakteristiky.
3. Účinnost – spolehlivě identifikuje požadovanou infekci.
4. Výsledky testu rychlosti lze získat do 24 hodin od jeho provedení.

Příprava na analýzu:

• Týden před plánovaným testem byste měla přestat užívat antikoncepční pilulky, protože mohou ovlivnit výsledky.
• Studie se neprovádí během menstruace a 3 dny po ní.
• Dva dny před testem byste se měli vyvarovat pohlavního styku.
• Diagnostika se provádí na lačný žaludek, poslední jídlo by mělo být 12 hodin před analýzou. Můžete ale pít vodu.
• V den odběru PCR testu na HPV se nedoporučuje provádět hygienické postupy ani chodit na toaletu čůrat dvě hodiny před odběrem materiálu.

Získané výsledky by měl interpretovat lékař. Indikátor do 3 Lg je nevýznamná koncentrace patogenu, 3-5 Lg je klinicky významná koncentrace a více než 5 Lg je vysoká. Za normálních okolností by všechny kvantitativní titry měly být negativní. Negativní výsledky však ne vždy naznačují absenci onemocnění. To se často pozoruje při nevýznamných koncentracích viru v těle a při jeho potlačení imunitním systémem.

Navzdory všem výhodám má PCR řadu nevýhod. Analýza by měla být prováděna pouze v moderní laboratoři, aby se předešlo falešným výsledkům. Zvláštní pozornost je třeba věnovat odběru materiálu. Dešifrovat výsledky by měl pouze lékař, protože pozitivní výsledky se mohou objevit po nedávné léčbě infekce.

Seškrábání na lidský papilomavirus

K detekci genitální HPV infekce u mužů se provádí seškrábání, tj. Digene test. Materiál se odebírá z močové trubice pomocí speciálního kartáčku, v některých případech se tkáň odebírá z hlavičky penisu. Před provedením testu se musíte osprchovat a důkladně se umýt. Porušení osobní hygieny negativně ovlivňuje výsledky testu.

U žen se při podezření na dysplazii, erozi a další patologické procesy způsobené HPV odebírá z děložního čípku. Pro odběr materiálu lékař odstraní vaginální výtok a do orgánu vloží malý kartáček, kterým otáčí kolem osy v děložním čípku. Po všech manipulacích se kartáček umístí do zkumavky s médiem a odešle se do laboratoře.

Získané materiály se odesílají k diferenciální diagnostice metodou PCR; cytologický screening se neprovádí. Výsledky jsou připraveny 2–3 dny po analýze. Získaná data představují kompletní informace o typu viru, jeho karcinogenitě a řadě dalších faktorů v průběhu onemocnění. Pokud jsou výsledky nesprávné, provádí se studie znovu. Opakovaný screening je nutný během léčby a po terapii, aby se zjistila její účinnost.

Stěr na lidský papilomavirus

Pokud se při gynekologickém vyšetření v oblasti genitálií objeví bradavice nebo kondylomy, lékař odebere stěr na HPV. Lékař přejede speciálním štětcem po postižených tkáních. Stěr se u žen odebírá z děložního čípku a u mužů z močové trubice. Odebraný biopsický materiál se odešle k vyšetření do laboratoře.

Při podezření na lidský papilomavirus se používají následující typy stěrů:

• PCR – detekuje DNA infekce. K provedení této analýzy se u mužů odebírá seškrab z močové trubice, u žen z pochvy a děložního čípku. Lze použít i sperma nebo moč.
• Digene testování je studium odebraného materiálu na molekulární úrovni. Testování spočívá v rozlišení dvou skupin papilomových infekcí současně - s vysokou a nízkou onkogenitou.

Výše uvedené studie klasifikují výsledky do 5 typů:

1. Absence atypických buněk.
2. Přítomnost změněných buněk v důsledku zánětlivého procesu.
3. Minimální počet buněk s atypickou strukturou.
4. Zhoubné buňky.
5. Velké množství onkogenních buněk.

Existuje také klasifikace podle systému Bethesda. Skládá se z indikátorů nízkého a vysokého stupně změn. V tomto případě je dekódování nátěru prezentováno následujícími údaji:

• NILM – normální epitel.
• ASCUS – změněné buňky v důsledku dysplazie, zánětu, pohlavně přenosné infekce nebo HPV.
• ASC-H – byly zjištěny abnormality ve struktuře dlaždicového epitelu. Tento výsledek naznačuje časná stádia onkologie nebo těžkou dysplazii.
• LSIL – v nátěru je přítomen malý počet změněných buněk. Značí dysplazii nebo papilomavirus.
• HSIL – významné změny v epitelu. Těžká dysplazie a výrazná onkologie. Pokud se tento výsledek ignoruje, pak se u 7 % pacientů během 3–5 let rozvine maligní onemocnění.
• AGC je atypický žlázový epitel. Vyskytuje se u rakoviny dělohy nebo dysplazie.
• AIS – raná stádia onkologie.
• Vysoce maligní SIL – dlaždicobuněčný karcinom.

Rychlost získání výsledků nátěru závisí na zvolené výzkumné metodě. Dešifrování je zpravidla připraveno za 2-3 dny.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]

Protilátky proti lidskému papilomaviru

Pro detekci protilátek proti HPV je indikován enzymový imunotest z krve. Principem této studie je stanovení přítomnosti imunoglobulinů proti infekčnímu agens. Diagnostika metodou ELISA ukazuje imunitní reakci těla na virus. V závislosti na detekovaných protilátkách se rozlišují následující stadia onemocnění:

• IgM – akutní.
• IgG – chronické nebo období zotavení.
• IgA – relaps chronické infekce.

Výsledky testu na protilátky jsou připraveny 1–3 dny po jeho odběru. Při dešifrování výsledků je třeba vzít v úvahu, že lidský papilomavirus může být nepřímou stopou, proto se provádí PCR a další testy k objasnění přítomnosti infekce. ELISA navíc nestanoví genotyp ani riziko karcinogenity viru.

[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]