PCR hepatitidy C

HCV v materiálu obvykle chybí.

Na rozdíl od sérologickou diagnózu hepatitidou C virových metod, kde protilátky proti HCV, PCR může detekovat přítomnost HCV RNA a přímo kvantifikovat jeho koncentraci v materiálu. Test má specifickou specificitu a vysokou citlivost: deset HCV RNA molekul v testovacím materiálu je dostatečné pro jeho detekci. Detekce protilátek proti HCV jen potvrzuje pacienta na skutečnost, infikované, ale neumožňuje ohodnotí aktivity infekčního procesu (replikace viru) a prognózu onemocnění. Kromě toho, protilátky proti HCV detekován v krvi pacientů s akutní a chronické hepatitidy, stejně jako u těch pacientů, kteří jsou nemocní a zpět, ale často protilátky objevují v krvi jen pár měsíců po nástupu klinického onemocnění, takže je obtížné diagnostikovat. Detekce HCV v krvi pomocí PCR je více informativní diagnostickou metodou. Identifikace HCV RNA pomocí PCR důkaz virémie, vypovídá o replikaci viru v těle a je jedním z kritérií pro účinnost antivirové terapie. Detekce HCV RNA pomocí PCR v raných fázích virové infekce na pozadí úplné absenci jakýchkoliv sérologických markerů může být nejdříve důkaz infekce. Izolovaná detekce HCV RNA na pozadí úplné absence jiných sérologických markerů však nemůže zcela vyloučit falešně pozitivní výsledek PCR. V takových případech je nezbytné komplexní hodnocení klinických, biochemických a morfologických studií s opakovaným opakovaným potvrzením přítomnosti PCR infekce.

Velmi důležité je použití PCR u pacientů s chronickou hepatitidou C, protože většina z nich nemá žádný vztah mezi přítomností virové replikace a aktivity jaterních enzymů. V takových případech pouze PCR umožňuje posoudit přítomnost virové replikace, zvláště pokud je konečný výsledek kvantitativně exprimován. Ve většině případů dochází ke zmizení HCV RNA z krevního séra později než normalizace jaterních enzymů, takže jejich normalizace nemůže sloužit jako základ pro zastavení antivirové léčby.

Pro detekci HCV RNA je prakticky důležité vyšetřit metodou PCR nejen sérum, ale také lymfocyty, hepatobiobaptam. Viry v játrech mohou být detekovány 2-3 krát častěji než v séru. Při hodnocení výsledků studie krevního séra pro HCV RNA je třeba vzít na vědomí, že viremie může mít fluktuační povahu (jako je změna enzymatické aktivity). Proto, po pozitivních výsledcích studie PCR, lze získat negativní výsledek a naopak. V takových případech vyřešíte pochybnosti, které vznikají, je lepší vyšetřovat hepatobiobaty.

Detekce HCV RNA v materiálu za použití PCR se používá pro následující účely:

• řešení sporných výsledků sérologických studií;
• diferenciace virové hepatitidy C z jiných forem hepatitidy;
• detekce akutního stavu onemocnění ve srovnání s přenosem infekce nebo kontaktu; fáze infekce novorozenců ze séropozitivních matek HCV;
• sledování účinnosti antivirové léčby.

Pacienti s podezřením na virovou hepatitidu C:

• dárci;
• osoby s rizikovými faktory;
• osoby se zvýšenou aktivitou ALT;
• pacientů s akutní hepatitidou

Všechny výše uvedené znaky hodnocení výsledků a přístupů k diagnostice HCV pomocí PCR se vztahují i na jiné infekce.

Metoda PCR umožňuje nejen detekci HCV RNA ve studovaném materiálu, ale také stanovení genotypu. Stanovení genotypu viru je velmi důležité pro výběr pacientů s chronickou virovou hepatitidou C k léčbě interferonem-alfa a ribavirinem. Laboratorní indikace pro léčbu chronické virové hepatitidy C interferonem alfa jsou následující:

• zvýšená aktivita transaminázy;
• přítomnost HCV RNA v krvi;
• genotyp 1 HCV;
• vysoká viremie v krvi (více než 8 x 10 ⁵ kopií / ml).

V současné době může být obsah HCV RNA v krevním séru kvantifikován pomocí PCR, který má velký význam pro kontrolu léčby interferonem alfa. Úroveň viremie je stanovena takto: u HCV RNA z 10 ² do 10 ⁴ kopií / ml - slabé; od 10 ⁵ do 10 ⁷ kopií / ml - médium, nad 10 ⁸ kopií / ml - vysoké. Účinná léčba snižuje hladinu viremie.

[1], [2], [3], [4]