Infekční mononukleóza: protilátky proti viru Epstein-Barr v krvi

Infekční mononukleóza je běžná systémová lymfoproliferativní onemocnění, nejčastěji způsobená virem Epstein-Barr. Toxoplasma gondii a další viry (CMV, virus lidské imunodeficience a lidský herpesvirus typu 6, rozpoznávané jako příčina náhlého exantému) mohou způsobit klinicky podobné onemocnění. Stejné etiologické látky mohou pravděpodobně způsobit vznik syndromu chronické únavy.

Epstein-Barr virus - virus herpes skupiny má afinitu pro B-lymfocyty dlouhých přetrvání v hostitelské buňce ve formě latentní infekce. Je rozšířen po celém světě. Struktura a velikost viru Epstein-Barrové je k nerozeznání od jiných herpetických virů, ale výrazně se liší od svých antigenních vlastností. Virus má membránový antigen (MA - membránový antigen), nukleární antigen (EBNA - Epstein-Barris nukleové antigen) a virový kapsidový antigen (VCA - virus kapsidový antigen).

K infekci dochází, když je virus přenášen slinami. Epstein-Barrové při požití infikuje hltanu epitel, způsobující zánět a horečku - typické klinické příznaky začaly infekční mononukleózu. Přísně lymfotropní virus, spojující S3α receptoru buněčné membráně B lymfocytů vyvolává proliferaci polyklonálních B lymfocytů s odpovídajícím zvýšením mandlí, systémový lymfadenopatie a splenomegalie. B-lymfocyty jsou transformovány (získávají schopnost nekonečného dělení), a v nepřítomnosti odpovídající buněčné imunitní odpovědi, tento proces může vyvíjet samozřejmě maligní (například X-vázanou syndrom lymfoproliferativní). Pokud buněčná imunita faktory řídit replikaci viru Epstein-Barrové v těle, klinické příznaky infekční mononukleózy postupně mizí.

Stejně jako ostatní herpetických virů, Epstein-Barrové virus může přetrvávat v latentní infekce (jeho DNA, obsažené v jádru malého množství B-lymfocytů). Epizodické asymptomatické reaktivace infekce - běžný jev, přibližně 20% zdravých mladých lidí vylučovat virus Epstein-Barrové se slinami. U jedinců s poškozenou imunitou (např AIDS, ataxie-teleangiektázie, u pacientů po transplantaci), se může vyvinout jasnou reaktivní infekci vlasové leukoplakie, intersticiální pneumonitida, nebo ve formě monoklonální B-buněčného lymfomu. Virem Epstein-Barrové je spojena etiologie nosohltanu karcinomu a Burkittova lymfomu.

Jeden z projevů infekční mononukleózy - vzhled v periferní krvi atypických lymfocytů (až 10% z celkového počtu lymfocytů). Atypické lymfocyty se nacházejí v krvi od počátku období klinických projevů infekce. Jejich koncentrace v krvi dosahuje vrcholu ke konci 2. Nebo začátku třetího týdne a může být udržována na úrovni 1,5-2 měsíců, úplné vymizení obvykle dochází k počátku 4. Měsíce nástupu. Přítomnost atypických lymfocytů - relativně necitlivé příznakem infekce způsobené virem Epstein-Barrové, ale má celkovou specificitu přibližně 95%.

Proliferace polyklonálních B lymfocytů v infekce způsobené virem Epstein-Barrové, vytváří velké množství autoprotilátek u pacienta, jako je například IgM anti-i (za studena aglutininu), revmatoidní faktor, antinukleární protilátky. Nejneobvyklejší Ig, objevit se v infekční mononukleózy, se nazývají heterofilních protilátek Paul-Bunnelya. Tyto protilátky patří do třídy IgM, které mají afinitu k jehněčí a koňské červených krvinek, nejsou zaměřeny na jakýkoli antigen Epstein-Barrové. Heterofilní protilátky - Náhodné produkty B-lymfatické proliferace (způsobená virem Epstein-Barrové), zobrazí se v prvním týdnu infekční mononukleózy a postupně mizí během rekonvalescence, obvykle nejsou detekovány v 3-6 měsíců.

Jako počáteční akutní fázi infekce stává latentní ve všech buňkách ve velkém počtu genomů objeví virus Epstein-Barrové (unikátní antigeny), a jádrového antigenu uvolnění do životního prostředí. V reakci na antigen se syntetizují specifické protilátky - hodnotné markery stupně onemocnění. Krátce poté, co se infikované lymfocyty B detekovat časný antigen (časný antigen - EA) - protein nezbytný pro replikaci viru Epstein-Barrové (ne konstrukční prvek viru). K časnému antigenu v těle pacienta se syntetizují protilátky třídy IgM a IgG. Spolu s plnou virovou vadou Epstein-Barra se objevují antigeny virové kapsidy (VCA) a membránový antigen (MA). Vzhledem k tomu, infekce ustoupila malé procento infikovaných virem Epstein-Barrové v lymfocyty imunitního zabraňuje degradaci a udržuje virový genom v latentní formě. Jaderný antigen (EBNA) viru Epstein-Barr je zodpovědný za jeho duplikaci a přežití.

Laboratorní testy mohou detekovat protilátky proti různým antigenům.

Ze sérologických metod diagnostiky infekční mononukleózy je nejběžnější reakce Paul-Bunnel (aglutinace) zaměřená na detekci heterofilních protilátek v séru. Titr heterofilních protilátek 1: 224 a vyšší v séru pacienta je uznán za diagnosticky významný, což potvrzuje diagnózu infekční mononukleózy. Heterofilní aglutinace je pozitivní u 60% mladých lidí po 2 týdnech a po 90% po 4 týdnech od vzniku klinických projevů onemocnění. Pro diagnostiku infekční mononukleózy je proto potřeba několik studií: během prvního týdne onemocnění (reakce může být negativní) a 1-2 týdny později (reakce může být pozitivní). Obsah heterofilních protilátek klesá po ukončení akutního období infekčního procesu, ale jejich titr se může stanovit do 9 měsíců po nástupu klinických příznaků. Reakce Paul-Bunnel se může z pozitivního na negativní, a to i na pozadí zbytkových hematologických a klinických příznaků u pacienta. Citlivost metody u dospělých je 98%, specificita je 99%. U dětí s infekční mononukleózy ve věku 2 let heterofilních protilátky byly detekovány pouze u 30% pacientů ve věku 2-4 let - 75% po dobu 4 let - více než 90%. Citlivost metody u dětí je nižší než 70%, specificita je 20%. Snížení a opětovné zvýšení titru heterofilních protilátek se může objevit v reakci na jinou infekci (nejčastěji u virových infekcí horních cest dýchacích). Odpověď Paul-Bunnel není specifická pro virus Epstein-Barr. Titr heterofilních protilátek neposkytuje křížovou reakci a neodpovídá specifickým protilátkám proti viru Epstein-Barr, ani neodpovídá závažnosti onemocnění. Test je nepoužitelný pro diagnostiku chronické formy infekční mononukleózy (pozitivní v průměru pouze u 10% pacientů).

Titry 1:56 nebo méně lze nalézt u zdravých lidí a u pacientů s jinými nemocemi (revmatoidní artritida, rubeola). Výsledky falešně pozitivních testů jsou velmi vzácné.

V současné době se pro detekci protilátek proti ovčích erytrocytů za použití metody „jedno místo“ (skluzavka aglutinace), používá se nejprve jako screeningový test. Citlivostí je srovnatelná s reakcí Paul-Bunnel. Posuvná falešně pozitivní testy mohou být asi 2% z těchto studií (leukemie, maligní lymfom, malárie, zarděnek, virová hepatitida, karcinom slinivky břišní) a falešně negativních dospělých - 5-7% případů.

Je třeba poznamenat, že spektrum vyrobené společností diagnostické soupravy na základě stanovení titru je velmi široký, a proto je třeba se zaměřit na diagnostické titru protilátek je uvedeno v pokynech pro zkušební systém.

Pokud heterofilní protilátky nejsou identifikovány a klinický obraz odpovídá infekční mononukleóza, je nutné přezkoumat, sérum specifických protilátek IgM a IgG. Pro detekci specifických protilátek proti viru Epstein-Barrové za použití nepřímé metody, imunofluorescenční (umožňují detekci protilátek proti VCA a EA antigenů) antialexin-imunofluorescence (protilátky proti EA, VCA a EBNA antigen) a IFA.

Protilátky proti komponentě EA antigenu D (anti-EA-D) se objevují i v latentním období primární infekce a rychle vymizí s obnovením.

Protilátky proti komponentě EA antigenu R (anti-EA-R) mohou být detekovány 3-4 týdny po klinických projevech onemocnění. Přetrvávají v krevním séru po dobu asi jednoho roku, často zjištěné s atypickými nebo prodlouženými proudy infekční mononukleózy. Obvykle se tyto protilátky objevují u Burkittova lymfomu.

Protilátky proti IgM třídy VCA (anti-VCA IgM) se objevují velmi brzy, obvykle klinickým příznakům, zjišťují se na počátku onemocnění ve 100% případů. Vysoké titry se vyskytují v 1-6. Týdnu od nástupu infekce, začínají klesat od 3. Týdne a obvykle po 1-6 měsících zmizí. Anti-VCA IgM je téměř vždy přítomno v séru s aktivní infekcí, takže metoda jejich detekce je velmi citlivá a specifická pro akutní epizodu infekční mononukleózy.

Protilátky proti IgG třídy VCA (anti-VCA IgG) se mohou objevit brzy (v týdnech 1-4), jejich množství dosáhne vrcholu druhým měsícem onemocnění. Na počátku onemocnění se vyskytují ve 100% případů. Pouze 20% pacientů prokázalo čtyřnásobné zvýšení titru ve studii sdružených sér. Titr poklesne po zotavení, ale je zjištěn během několika let po přenesené infekci, proto je pro diagnózu infekční mononukleózy zbytečné. Přítomnost anti-VCA IgG indikuje stav po infekci a imunitě.

Protilátky proti EBNA (anti-EBNA) se objevují později než všechny, jsou zřídka přítomny v akutní fázi onemocnění. Jejich obsah se během ozdravného období zvyšuje (v období 3-12 měsíců), ale může trvat mnoho let po onemocnění v krvi. Nedostatek anti-EBNA v přítomnosti anti-VCA IgM a anti-EA IgM indikuje současnou infekci. Detekce anti-EBNA po předchozí negativní reakci naznačuje existenci infekce. Při použití metody ELISA je možné současně detekovat přítomnost tříd anti-EBNA IgM a IgG. Je-li množství anti-EBNA IgM větší než anti-EBNA IgG, měla by být zvážena akutní infekce, přičemž reverzní vztah je předchozí.

Ve prospěch akutní primární infekce jeden nebo více z následujících příznaků naznačuje přítomnost:

• anti-VCA IgG (detekováno brzy a později je obsah snížen);
• Vysoký titr (více než 1: 320) nebo čtyřnásobné zvýšení titru anti-VCA IgG v průběhu onemocnění;
• přechodný vzestup titru anti-EA-D (1:10 nebo více);
• časný anti-VCA IgG bez anti-EBNA a později - vznik anti-EBNA.

Akutní nebo primární infekce způsobené virem Epstein-Barrové, vyloučit, pokud se titry anti-VCA IgG a anti-EBNA v séru nejsou během doby studie změnit (v akutní fázi a zotavení).

Konstantní přítomnost časného antigenu a anti-VCA IgG u vysokých titrů indikuje chronickou fázi infekce.

Detekce protilátek proti viru Epstein-Barr se používá k diagnostice infekční mononukleózy a chronických infekcí způsobených virem Epstein-Barr.

Protilátky proti viru Epstein-Barrové může být detekována v následujících chorob: sekundární imunodeficience, včetně infekce HIV, nasofaryngeální karcinom, Burkittův lymfom, infekce CMV, syfilis, lymské nemoci, brucelóza, a další.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]