Testování citlivosti na antibiotika: příprava, dešifrování, kolik se toho dělá

Testování citlivosti na antibiotika se dnes stává stále populárnějším. Lidská mikroflóra je poměrně rozmanitá, reprezentovaná velkým počtem mikroorganismů v různých biotopech.

Farmaceutické společnosti vyvinuly velké množství antibakteriálních látek, antibiotik, které pomáhají udržovat normální poměr a počet mikrobiálních populací. S nástupem éry antibiotik se podařilo vyléčit mnoho nemocí, které byly dříve považovány za smrtelné. Mikroorganismy se však také snaží přežít a postupně se přizpůsobují působení antibakteriálních léků. Postupem času si mnoho z nich získalo rezistenci vůči mnoha lékům, zafixovalo ji v genotypu a začalo ji přenášet z generace na generaci. Nové mikroorganismy jsou tedy zpočátku necitlivé na určité léky a jejich použití může být neúčinné. Lékárníci vyvíjejí stále více nových produktů, přidávají do nich nové aktivní složky a mění základní složení. Postupně se však vyvíjí i rezistence vůči nim.

Důvod zvýšené rezistence mikroflóry vůči mnoha lékům, a dokonce i jejich analogům, se často skrývá v nesprávném a nekontrolovaném užívání antibiotik. Lékaři předepisují antibiotika a jejich kombinace na různá bakteriální onemocnění. Zároveň neexistuje žádné předběžné posouzení jejich účinnosti, není zvoleno optimální dávkování, což je velmi důležité jak pro léčbu, tak pro prevenci mechanismů rozvoje další rezistence. Mnoho lidí mylně předepisuje antibakteriální terapii i u virových onemocnění, která je neúčinná, protože antibiotikum nepůsobí proti virům.

Terapie je často předepisována bez předchozího testování citlivosti, výběru účinné látky a požadovaného dávkování pro každé konkrétní onemocnění a biotop. Vzhledem k tomu, že antibiotika jsou předepisována „naslepo“, často se vyskytují případy, kdy nevykazují žádnou aktivitu proti mikroorganismům, které onemocnění způsobily a jejichž počet je třeba snížit. Místo toho ovlivňují jiné zástupce mikroflóry, což vede k dysbakterióze, která je také poměrně nebezpečnou patologií a může vést k vážným následkům. Obzvláště nebezpečné jsou případy, kdy antibiotikum ničí normální mikroflóru, která je určena k ochraně těla a udržování jeho normálního fungování. Existují také případy, kdy je předepsáno příliš mnoho nebo příliš málo léku.

Pacienti jsou také nezodpovědní ohledně léčby. Léčba je často ukončena poté, co příznaky onemocnění přestanou být nepříjemné. Zároveň mnozí raději neabsolvují celou kúru. To je jeden z faktorů, které přispívají k rozvoji rezistence bakterií. Celá kúra je navržena tak, aby zcela zlikvidovala patogenní mikroflóru. Pokud kúra není dokončena, není zcela zlikvidována. Ty mikroorganismy, které přežijí, procházejí mutacemi, vyvíjejí mechanismy, které jim poskytují ochranu před tímto lékem, a předávají ji dalším generacím. Nebezpečí spočívá v tom, že rezistence se vyvíjí nejen ve vztahu k tomuto konkrétnímu léku, ale i k celé skupině léků.

Proto je dnes jedním z nejúčinnějších prostředků racionální terapie a prevence rezistence předběžné stanovení citlivosti na předepsané léčivo a výběr jeho optimálního dávkování.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]

Indikace postupu testy citlivosti na antibiotika

Obvykle by se taková analýza měla provádět ve všech případech, kdy je nutná antibakteriální terapie. Na základě základních zákonů antibiotické terapie lze jakékoli antibiotikum předepsat pouze po předběžném posouzení citlivosti mikroflóry na toto činidlo a stanovení optimální koncentrace účinné látky v laboratorních podmínkách. V praxi se z různých důvodů a okolností taková studie před zahájením léčby neprovádí a lékař je nucen vybrat lék „náhodně“.

Dnes se testování citlivosti provádí pouze v případech, kdy má lékař vážné pochybnosti o tom, zda bude předepsaný lék účinný, v případech dlouhodobé absence účinku léku a také při opakovaném užívání stejného léku v omezeném časovém období. Citlivost se často stanovuje při léčbě pohlavně přenosných chorob. Mnoho specialistů se k analýze obrací v případě nežádoucích účinků, alergických reakcí a když je nutné jeden lék nahradit jiným.

Analýza se také často používá k výběru léků pro antibakteriální terapii v období rekonvalescence po operacích, laparoskopických zákrocích a odběrech orgánů. Na chirurgických a hnisavých chirurgických odděleních je taková studie prostě nezbytná, protože se zde poměrně rychle rozvíjí rezistence. Kromě toho se vyvíjejí superrezistentní „nemocniční“ formy. Mnoho soukromých klinik přistupuje k předepisování léků s plnou odpovědností – až po ověření citlivosti. V mnoha případech rozpočet státních institucí jednoduše neumožňuje provádět takové studie u každého pacienta, který antibakteriální terapii potřebuje.

[ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Příprava

Příprava na vyšetření nevyžaduje žádná zvláštní opatření. Je stejná jako u jakýchkoli testů. Několik dní před vyšetřením byste se měli zdržet pití alkoholu. Ráno, v den odběru materiálu, ve většině případů nemůžete jíst ani pít. Vše však závisí na typu analýzy. Materiál pro vyšetření se může lišit v závislosti na onemocnění.

V případě onemocnění krku a dýchacích cest se odebírá výtěr z krku a nosu. Ve venerologii, gynekologii, urologii se odebírají výtěry z genitálií a krev k analýze. U onemocnění ledvin je často nutná moč. V případě onemocnění gastrointestinálního traktu a některých infekčních onemocnění se vyšetřuje stolice a zvratky. Někdy lze vyšetřit mateřské mléko, výtok z nosu, oční sekret, sliny a sputum. V případě závažných patologií a podezření na infekční proces se vyšetřuje i mozkomíšní mok. Spektrum je poměrně široké.

Charakteristiky odběru materiálu jsou určeny jeho biologickou příslušností. Moč a stolice se tedy odebírají ráno do čisté nádoby nebo do speciální nádoby na biologický materiál. Mateřské mléko se odebírá před krmením. Střední část se odebírá k vyšetření. Stěr se odebírá speciálním tamponem, který se prochází po sliznicích a poté se spustí do zkumavky s připraveným médiem. Krev se odebírá do zkumavky z prstu nebo žíly. Při odběru stěrů z močové trubice nebo pochvy se doporučuje několik dní zdržet se pohlavního styku.

Při odběru biologického materiálu pro výzkum je v první řadě nutné zajistit jeho správnost a sterilitu. Ve většině případů je to však starost zdravotnického personálu, pacient by se o to neměl starat. Nejčastěji se na takové studie obracejí gynekologové a urologové, na druhém místě otorinolaryngologové při léčbě onemocnění nosohltanu a hltanu, horních cest dýchacích.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Technika testy citlivosti na antibiotika

Odebraný biologický materiál je sterilně doručen do laboratoře, kde se provádí další výzkum. Nejprve se provede jeho primární očkování na univerzální živná média. Část materiálu se také odebere k mikroskopickému vyšetření. Připraví se nátěr pro mikroskopii a provede se studie, s jejíž pomocí je možné určit přibližný obraz a předpokládat, jaké mikroorganismy jsou ve vzorku přítomny. To umožňuje vybrat nejoptimálnější prostředí pro další výzkum a identifikaci mikroorganismů. Mikroskopií lze také pozorovat známky zánětu a onkologického procesu.

Během několika dnů rostou kolonie mikroorganismů v Petriho misce. Poté se odebere několik kolonií a přenese se na selektivní živná média, která umožňují určit přibližnou skupinu mikroorganismů. Několik dní se inkubují v termostatu a poté se začíná s identifikací (určením typu mikroorganismu). Identifikace se provádí pomocí speciálních biochemických a genetických testů, identifikátorů. Dále lze provést imunologické studie.

Po izolaci hlavního patogenu se posoudí jeho citlivost na antibiotika. Existuje pro to několik metod. Nejčastěji používanou metodou je sériové ředění nebo disková difuzní metoda. Metody jsou podrobně popsány v mikrobiologických referenčních publikacích, směrnicích a laboratorních standardech.

Podstata diskové difuzní metody spočívá v tom, že identifikované mikroorganismy se vysejí na živné médium a na něj se umístí speciální disky namočené v antibiotikách. Výsev se několik dní inkubuje v termostatu a poté se měří výsledky. Posuzuje se stupeň inhibice růstu bakterií jednotlivými antibiotiky. Pokud je bakterie citlivá na antibiotikum, vytvoří se kolem disku „lyzační zóna“, ve které se bakterie nerozmnožují. Jejich růst je pomalý nebo zcela chybí. Průměr zóny inhibice růstu se používá k určení stupně citlivosti mikroorganismů na antibiotikum a k formulaci dalších doporučení.

Metoda sériového ředění je nejpřesnější. Pro tento účel se mikroorganismy vysejí na tekutá živná média, přidá se antibiotikum zředěné podle systému desetinného ředění. Poté se zkumavky umístí na několik dní do termostatu k inkubaci. Citlivost na antibiotika se určuje stupněm růstu bakterií v živném bujónu s přídavkem antibiotik. Zaznamenává se minimální koncentrace, při které mikroorganismy stále rostou. Toto je minimální dávka léčiva (je nutný přepočet z mikrobiologických jednotek na účinnou látku).

Jedná se o standardní mikrobiologické metody, které tvoří základ jakéhokoli výzkumu. Zahrnují ruční provádění všech manipulací. Dnes je mnoho laboratoří vybaveno speciálním zařízením, které všechny tyto postupy provádí automaticky. Specialista pracující s takovým zařízením potřebuje pouze schopnost s ním pracovat a dodržování bezpečnostních a sterilitních pravidel.

Je nutné vzít v úvahu, že indexy citlivosti v laboratorních podmínkách a v živých organismech se výrazně liší. Proto je osobě předepsána vyšší dávka, než byla stanovena během studie. To je dáno tím, že tělo nemá takové optimální podmínky pro růst bakterií. V laboratoři se vytvářejí „ideální podmínky“. Část léku může být neutralizována působením slin, žaludeční šťávy. Část je neutralizována v krvi protilátkami a antitoxiny produkovanými imunitním systémem.

Test citlivosti na antibiotika v moči

Nejprve se odebere biologický materiál. K tomu je třeba odebrat střední část ranní moči a doručit ji do laboratoře. Je důležité dodržovat sterilitu a několik dní před analýzou neužívat antibiotika, jinak můžete získat falešně negativní výsledek. Poté se provede standardní výsev, jehož podstatou je izolace čisté kultury patogenu a výběr antibiotika, které na něj bude mít optimální baktericidní účinek. Stanoví se požadovaná koncentrace antibiotika.

Analýza moči se nejčastěji předepisuje, pokud existuje podezření na infekční a zánětlivý proces v urogenitálním systému, s imunodeficiencí a metabolickými poruchami. Moč je obvykle sterilní tekutina. Doba trvání takové studie je 1-10 dní a je určena rychlostí růstu mikroorganismu.

Kultivační a antibiotické testy

Studie zahrnuje izolaci mikroorganismu, který je patogenem, do čisté kultury. Někdy může být takových mikroorganismů několik (smíšená infekce). Některé mikroorganismy jsou schopny tvořit biofilmy, což jsou jakési „mikrobiální komunity“. Míra přežití biofilmů je mnohem vyšší než u jednotlivých mikroorganismů nebo jejich asociací. Navíc ne všechna antibiotika jsou schopna ovlivnit biofilm a proniknout do něj.

Pro stanovení patogenu a jeho izolaci do čisté kultury se provádí výsev. Během studie se provádí několik výsevů do různých živných médií. Poté se izoluje čistá kultura, určí se její biologická příslušnost a stanoví se citlivost na antibakteriální léky. Zvolí se optimální koncentrace.

Pro studii lze použít jakýkoli biologický materiál v závislosti na onemocnění a lokalizaci infekčního procesu. Doba trvání je určena rychlostí růstu mikroorganismů.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]

Test citlivosti stolice

Stolice se vyšetřuje u různých žaludečních a střevních onemocnění, při podezření na infekční proces, bakteriální intoxikaci, otravě jídlem. Účelem studie je izolovat patogen a vybrat pro něj optimální antibakteriální léky, které budou mít vysokou aktivitu. Význam tohoto typu studie spočívá v tom, že je možné vybrat lék, který bude ovlivňovat pouze patogen a nebude ovlivňovat zástupce normální mikroflóry.

První a velmi důležitou fází je sběr stolice. Měla by být odebrána do speciální sterilní nádoby ráno. Měla by být skladována maximálně 1-2 hodiny. Ženy s menstruačním krvácením by měly analýzu odložit na konec, protože se změní přesnost výsledků. Materiál je doručen do laboratoře k vyšetření. Analýza se provádí standardními mikrobiologickými technikami setí a izolace čisté kultury. Provádí se také antibiogram. Na základě závěru jsou vypracována doporučení a stanoven další studijní plán.

[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Analýza dysbakteriózy s citlivostí

Materiálem pro studii je stolice odebraná bezprostředně po aktu defekace. Normální mikroflóra gastrointestinálního traktu se skládá ze zástupců normální flóry a několika zástupců patogenní flóry. Jejich druhové složení, množství a poměr jsou striktně definovány a udržují se v rámci přípustné normy. Pokud je tento poměr narušen, rozvíjí se dysbakterióza. Může se projevovat různými způsoby. Infekční onemocnění se mohou rozvinout, pokud se množství patogenní mikroflóry prudce zvýší. Pokud se množství jakéhokoli mikroorganismu prudce sníží, volný prostor je obsazen jinými zástupci, kteří nejsou pro gastrointestinální trakt typičtí nebo patogenní. Volný prostor je často obsazen houbou, a pak se rozvíjejí různé plísňové infekce a kandidóza.

Za účelem stanovení kvantitativního a kvalitativního složení střevní mikroflóry se provádí analýza stolice na dysbakteriózu. Obvykle se všichni zástupci žijící ve střevě dělí do tří skupin: patogenní, oportunní a nepatogenní. Analýza se tedy skládá ze tří částí. Každá skupina mikroorganismů má své vlastní potřeby, pokud jde o zdroj potravy a energii. Každá skupina vyžaduje samostatná živná média a selektivní přísady.

Nejprve se provede mikroskopie a primární očkování. Po očkování se vyberou největší kolonie, které se morfologickými znaky podobají zástupcům každé skupiny. Ty se přenesou do selektivních médií. Po narůstání mikroorganismů se identifikují a ihned se testuje jejich citlivost na antibiotika. Používají se standardní mikrobiologické metody.

Studium skupiny patogenních mikroorganismů zahrnuje kromě standardních studií i stanovení bakterií tyfu, paratyfu a úplavice. Zjišťuje se také, zda je daná osoba nositelem těchto mikroorganismů. Komplexní vyšetření na dysbakteriózu zahrnuje také vyšetření zástupců skupiny bifidobakterií a laktobacilů. Studie trvá přibližně týden a závisí na rychlosti růstu mikroorganismů.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]

Testování citlivosti na bakteriofágy

V případě střevní infekce se bakteriofágy často používají k léčbě místo antibiotik. Bakteriofágy jsou bakteriální viry, které jsou citlivé pouze na ně. Najdou bakterii, se kterou se doplňují, proniknou do ní a postupně ničí bakteriální buňku. V důsledku toho se infekční proces zastaví. Ne všechny bakterie jsou však citlivé na bakteriofágy. Aby se zjistilo, zda daný bakteriofág projeví aktivitu vůči zástupcům mikroflóry, je nutné provést analýzu.

Materiálem pro studii je stolice. Analýza musí být doručena do laboratoře do hodiny, jinak ji nebude možné provést. Analýzu je nutné provést v několika opakováních. Počáteční metoda je podobná metodě pro stanovení citlivosti na antibiotika. Nejprve se provede předběžná mikroskopie vzorku, poté primární výsev na univerzální živná média. Poté se na selektivní živná média izoluje čistá kultura.

Hlavní práce se provádí s čistou kulturou. Ty se ošetřují různými typy bakteriofágů. Pokud se kolonie rozpustí (lýzuje), ukazuje to na vysokou aktivitu bakteriofága. Pokud je lýza částečná, bakteriofág funguje mírně. Při absenci lýzy můžeme hovořit o rezistenci vůči bakteriofágu.

Výhodou fágové terapie je, že bakteriofágy neovlivňují lidské tělo a nezpůsobují vedlejší účinky. Vázají se na určité typy bakterií a lyzují je. Nevýhodou je, že jsou velmi specifické a mají selektivní účinek, a proto se nemohou vždy navázat na bakterie.

[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ], [ 37 ], [ 38 ]

Analýza sputa na citlivost na antibiotika

Analýza je studiem výtoku z dolních cest dýchacích. Cílem je určit typ mikroorganismů, které působí jako původce onemocnění. Provádí se také antibiogram. V tomto případě se stanoví citlivost patogenu na antibiotika a zvolí se optimální koncentrace. Používá se při onemocněních dýchacích cest.

Vyšetření sputa a dalšího obsahu plic a průdušek je nezbytné pro volbu léčebného režimu a pro rozlišení různých diagnóz. Používá se k potvrzení nebo vyvrácení přítomnosti tuberkulózy.

Nejprve je nutné získat biologický materiál. Lze jej získat kašláním, vykašláváním nebo odběrem z průdušnice během bronchoskopie. Existují speciální aerosoly, které podporují vykašlávání. Před odběrem sputa je třeba ústa vypláchnout vodou, což sníží stupeň bakteriální kontaminace ústní dutiny. Nejprve se doporučuje 3x zhluboka se nadechnout a vyvolat produktivní kašel. Sputum lze také odebrat aspirací z průdušnice. V tomto případě se do průdušnice zavádí speciální katétr. Během bronchoskopie se do bronchiální dutiny zavádí bronchoskop. V tomto případě se sliznice promaže anestetikem.

Materiál je poté odeslán do laboratoře k vyšetření. Provede se standardní očkování a mikroskopie. Poté se izoluje čistá kultura a s ní se provádějí další manipulace. Provede se antibiogram, který umožňuje identifikovat spektrum citlivosti bakterií a zvolit optimální dávkování.

Pokud existuje podezření na tuberkulózu, ranní sputum se vyšetřuje po dobu tří dnů. Při testování na tuberkulózu bude výsledek připraven za 3-4 týdny, protože Mycobacterium tuberculosis, které je původcem onemocnění, roste velmi pomalu.

Normálně by měli být detekováni zástupci normální mikroflóry dýchacích cest. Je také nutné vzít v úvahu, že při snížené imunitě se ukazatele normální mikroflóry mohou lišit.

Analýza spermií na citlivost na antibiotika

Jedná se o bakteriologické vyšetření ejakulátu spermií s následným výběrem citlivých antibiotik a jejich koncentrací. Nejčastěji se provádí při léčbě neplodnosti a dalších onemocnění mužského reprodukčního systému. V případě, že je onemocnění doprovázeno infekčním procesem. Hlavní příčinou mužské neplodnosti je ve většině případů infekce. Obvykle se nejprve provádí spermogram. Na základě výsledků se stanoví schopnost spermií oplodnit. Pokud se v této analýze zjistí velký počet leukocytů, můžeme hovořit o zánětlivém procesu. V tomto případě se obvykle okamžitě předepíše mikrobiologické vyšetření, protože zánět je téměř vždy doprovázen infekcí. Na základě získaných výsledků se zvolí vhodná terapie. Vyšetření obvykle předepisuje androlog.

Prostatitida a pohlavní choroby jsou také důvodem k provedení analýzy. Předepisuje se také, pokud je u partnera zjištěna pohlavní choroba.

Základem správné analýzy je v první řadě správný odběr biologického materiálu. Materiál se odebírá do speciálních nádob se širokým hrdlem. Skladovací teplota by měla odpovídat teplotě lidského těla. V tomto případě lze materiál skladovat maximálně hodinu. V zmrazené formě lze skladovat maximálně jeden den. Není vhodné odebírat kultivaci během užívání antibiotik, mohlo by to změnit klinický obraz. Kultivace se obvykle odebírá před zahájením antibiotické terapie. Nebo se léky přeruší 2–3 dny před analýzou.

Poté se vyseje na živné médium. Inkubuje se v termostatu po dobu 1–2 dnů. Poté se izoluje čistá kultura, provede se identifikace, stanoví se citlivost a také typ a rychlost růstu každé kolonie. Citlivost na antibiotika se stanoví, pokud jsou detekovány patogenní mikroorganismy. Analýza trvá v průměru 5–7 dní.

[ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ], [ 43 ]

Test citlivosti na lepek

Existuje mnoho testů, které lze použít k určení imunologické citlivosti na různé látky nebo patogeny. Dříve byla hlavní metodou provádění testů založených na aglutinační reakci protilátek a antigenů. Dnes se tyto testy používají stále méně, protože jejich citlivost je mnohem nižší než u mnoha moderních metod, jako jsou lepkové testy. Nejčastěji se v praxi uchylují k testu slin na lepek a analýze stolice.

Test citlivosti na lepek se používá k diagnostice různých střevních poruch. Je založen na reakci imunitního systému. Pokud je do stolice přidán lepek, reakce se objeví nebo chybí. Toto je považováno za falešně pozitivní nebo falešně negativní výsledek. Pozitivní výsledek naznačuje predispozici ke kolitidě, vysokou pravděpodobnost jejího vzniku. Potvrzuje také celiakii.

Je také možné provést lepkový test s použitím slin jako biologického materiálu. Je možné měřit množství protilátek proti gliadinu. Pozitivní výsledek naznačuje citlivost na lepek. To může naznačovat vysokou pravděpodobnost cukrovky. Pokud jsou oba testy pozitivní, lze potvrdit cukrovku nebo celiakii.

[ 44 ], [ 45 ]

Test citlivosti na chlamydie na antibiotika

Analýza se provádí při léčbě infekčních a zánětlivých onemocnění urogenitálního traktu, pokud existuje podezření na chlamydie. Materiálem pro vyšetření je seškrábnutí z vaginální sliznice - u žen, stěr z močové trubice - u mužů. Odběr se provádí v procedurální místnosti pomocí jednorázového vybavení. Je důležité dodržovat sterilitu. Před odběrem materiálu byste se měli zdržet intimity 1-2 dny před zahájením vyšetření. Pokud žena menstruuje, materiál se odebírá 3 dny po jejím úplném ukončení.

Materiál je doručen do laboratoře. Kompletní analýza zahrnuje předběžnou mikroskopii nátěru. To umožňuje vizuálně určit mikroflóru podle morfologických znaků a správně vybrat živná média. Obsah hlenu, hnisu a epiteliálních částic může přímo či nepřímo naznačovat rozvoj zánětlivého procesu nebo maligní degeneraci buněk.

Poté se provede primární osetí. Kultura se několik dní inkubuje v termostatu a identifikace se provádí na základě kultivačních charakteristik. Poté se kultura přenese na selektivní živná média určená pro kultivaci chlamydií. Výsledné kolonie se identifikují pomocí biochemických testů. Poté se standardními metodami stanoví citlivost na antibiotika. Vybere se nejcitlivější antibiotikum a jeho koncentrace. Pro kultivaci chlamydií jsou potřeba speciální média vyvinutá speciálně pro tento typ mikroorganismu, která obsahují všechny potřebné látky a růstové faktory.

Studie je také možná biologickou metodou. K tomu se patogenem infikují krysy. V některých laboratořích se místo krys používá speciálně pěstovaná tkáňová kultura. To je dáno tím, že chlamydie jsou intracelulární paraziti a pro jejich kultivaci jsou nutné speciální podmínky. Poté se mikroorganismy stanoví metodou PCR. Pro stanovení citlivosti se transplantují na selektivní živné médium pro chlamydie a po několika dnech se zaznamenají výsledky. Rezistence nebo citlivost se posuzuje podle potlačení infekčního procesu v buňkách.

[ 46 ], [ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]

Jak dlouho trvá provedení testu citlivosti na antibiotika?

V průměru se analýza provádí do 5-7 dnů. Některé analýzy trvají déle. Například při diagnostice tuberkulózy se na výsledky musí čekat 3 týdny až měsíc. Vše závisí na rychlosti růstu mikroorganismů. Laboratorní personál se často musí potýkat s případy, kdy pacienti žádají o rychlejší provedení analýzy. A dokonce nabízejí „příplatek“ za urgentnost. Zde je však třeba pochopit, že v tomto případě nic nezávisí na jednání laboranta. Záleží pouze na tom, jak rychle mikroorganismus roste. Každý typ má svou vlastní, striktně definovanou rychlost růstu.

Normální výkon

Neexistují absolutní univerzální normy pro všechny analýzy. Zaprvé, tyto hodnoty se mohou lišit pro každý biotop. Zadruhé, jsou individuální pro každý mikroorganismus. To znamená, že normy pro stejný mikroorganismus, například pro krk a střeva, se liší. Pokud tedy v krku převládá stafylokok jako zástupce normální mikroflóry, pak ve střevech převládají E. coli, bifidobakterie a laktobakterie. Hodnoty pro stejný mikroorganismus v různých biotopech se také mohou výrazně lišit. Například Candida může být normálně v určitém množství přítomna v urogenitální mikroflóře. V ústní dutině se normálně nevyskytuje. Přítomnost Candidy v ústní dutině může naznačovat její umělé zavlečení z jejich přirozeného prostředí.

Moč, krev, mozkomíšní mok jsou biologická prostředí, která by za normálních okolností měla být sterilní, tj. neměla by obsahovat žádnou mikroflóru. Přítomnost mikroflóry v těchto tekutinách naznačuje silný zánětlivý, infekční proces a také naznačuje riziko vzniku bakteriemie a sepse.

Obecně existuje přibližná klasifikace. Jednotkou měření v mikrobiologii je CFU/ml, tj. počet jednotek tvořících kolonie v 1 mililitru biologické tekutiny. Stupeň kontaminace je určen počtem CFU a pohybuje se v širokém rozmezí od 101 ^do 109. ^101je tedy minimální počet mikroorganismů, ¹⁰⁹ je závažný stupeň infekce. Současně je rozmezí do 103 ^považováno za normální, všechny ukazatele nad tímto číslem naznačují patologické množení bakterií.

Pokud jde o citlivost na antibiotika, všechny mikroorganismy se dělí na rezistentní, středně citlivé a citlivé. Tento výsledek se často vyjadřuje jako kvalitativní charakteristika udávající MID - minimální inhibiční dávku antibiotika, která stále inhibuje růst mikroorganismu. Pro každého člověka, stejně jako pro každý mikroorganismus, jsou tyto ukazatele přísně individuální.

[ 54 ], [ 55 ], [ 56 ], [ 57 ]

Zařízení pro analýzu

Při provádění bakteriologických studií, zejména při stanovení citlivosti na antibiotika, jeden přístroj nestačí. Je nezbytné kompletní a komplexní vybavení bakteriologické laboratoře. Je nutné pečlivě naplánovat a vybrat vybavení, které bude odpovídat každé fázi výzkumu. Ve fázi sběru biologického materiálu jsou nezbytné sterilní nástroje, boxy, krabice, kontejnery, skladovací komory a přepravní zařízení pro dopravu materiálu do laboratoře.

V laboratoři budete v první řadě potřebovat vysoce kvalitní mikroskop pro mikroskopii stěru. Dnes existuje velké množství mikroskopů s různými vlastnostmi - od tradičních světelných až po fázově kontrastní a atomární silové mikroskopy. Moderní vybavení umožňuje skenovat obraz v trojrozměrném prostoru a zkoumat ho při vysokém zvětšení s vysokou přesností.

Ve fázi setí a inkubace mikroorganismů mohou být vyžadovány autoklávy, boxy se suchým teplem, exsikátory, parní lázně a centrifuga. Je vyžadován termostat, ve kterém probíhá hlavní inkubace biologického materiálu.

Ve fázi identifikace mikroorganismu a provádění antibiogramu mohou být pro různé výpočty a posouzení biochemických vlastností kultur vyžadovány mikromanipulátory, hmotnostní spektrometry, spektrofotometry a kolorimetry.

Moderní laboratoře mohou být navíc vybaveny high-tech zařízením, které provádí všechny výše uvedené hlavní fáze výzkumu, a to až po výpočet výsledků v automatickém režimu. Mezi taková zařízení patří například komplexní zařízení bakteriologické laboratoře založené na hmotnostním spektrometru s měřením doby letu záření. Tato řada zařízení umožňuje rozdělit celé území laboratoře do tří zón. První zóna je špinavá, kde se přijímají a registrují testy. Druhá zóna je pracovní zóna, kde se provádí hlavní mikrobiologický výzkum. A třetí zóna je sterilizační a autoklávovací, kde se provádí příprava a likvidace pracovního materiálu.

Modely umožňují inkubaci v širokém rozsahu teplot a podmínek. Obsahují vestavěný analyzátor krve a dalších biologických vzorků, který poskytuje výsledky s vysokou přesností a spolehlivostí. Sada obsahuje elektronické váhy, bidestilátory, centrifugy, autoklávy a sterilizační skříně, automatický vařič média, vodní lázeň s vestavěným míchadlem, pH metry, teploměry a mikroskopy.

Používá se také mikrobiologický analyzátor, do kterého se umístí testované vzorky, živná média a sady testů pro stanovení citlivosti. Přístroj provede potřebné studie a vydá hotový závěr.

Zvyšování a snižování hodnot

Analýzu dokáže rozluštit pouze lékař. Pacienti však po obdržení výsledků často panikaří a všimnou si velkého množství nesrozumitelných symbolů a čísel. Abyste se neztratili, je vhodné mít alespoň obecnou představu o tom, jak rozluštit analýzu citlivosti na antibiotika. Obvykle první položka ve výsledcích uvádí název mikroorganismu, který je původcem onemocnění. Název je uveden v latině. Může také označovat zástupce normální mikroflóry, která v těle převládá, takže není třeba panikařit. Druhá položka udává stupeň očkování, tj. počet mikroorganismů. Obvykle se toto číslo pohybuje od 101 ^do 109. ^Třetí položka uvádí formu patogenity a čtvrtá názvy antibakteriálních léčiv, na která je tento mikroorganismus citlivý. Vedle je uvedena minimální inhibiční koncentrace, při které je růst mikroorganismu potlačen.

[ 58 ], [ 59 ], [ 60 ], [ 61 ], [ 62 ], [ 63 ]