Virus hepatitidy E

Virus hepatitidy E (HEV) má kulovitý tvar o průměru 27-34 nm, typ symetrie nukleokapsidy je ikosahedrický, nemá vnější membránu.

Virus hepatitidy E byl identifikován ve stolici pacientů, kteří prodělali virovou hepatitidu typu non-A, non-B enterální cestou infekce, a také ve stolici experimentálních zvířat (opic) infikovaných stejným materiálem obsahujícím virus, a to za použití imunitní elektronové mikroskopie (IEM) s použitím séra od rekonvalescentů této hepatitidy.

Dosud bylo zjištěno, že virus hepatitidy E má následující fyzikálně-chemické a biologické vlastnosti.

• Morfologicky je reprezentován kulovitými částicemi bez obalu; jejich povrch má hroty a prohlubně; virus se rozpadá při vystavení CS CL, zmrazení/rozmrazení a uchovává se při -20 °C.
• Průměr virových částic je od 32 do 34 nm.
• Genom je reprezentován RNA dlouhou 7,5 kb, jednovláknovou, polyadenylovanou.
• Sedimentační koeficient je 183 S (pro defektní virové částice - 165 S). Vztlaková hustota je 1,29 g/cm3 ^v gradientu KTa/Glu.
• Kultivace in vitro byla neúspěšná.
• Intracerebrální podání suspenze fekálního extraktu obsahujícího částice HEV sajícím myším u nich nezpůsobuje onemocnění.

Pomocí molekulárního klonování bylo z žluči infikovaných makaků získáno velké množství HEV. Byla prokázána identita virových částic získaných z fekálních extraktů pacientů s hepatitidou E v různých oblastech světa (Somálsko, Borneo, Pákistán, Střední Asie atd.). Struktura genomu HEV byla prakticky rozluštěna. Analýzou nukleotidových sekvencí a organizace genomu bylo zjištěno, že HEV se liší od pikornavirů a že nemůže patřit mezi kaliciviry (caliciviry), jak se původně předpokládalo.

Genom je reprezentován jednovláknovou nefragmentovanou pozitivní RNA o délce 7500 bází, obsahuje tři otevřené čtecí rámce kódující proteiny specifické pro virus. Na povrchu virionu se nacházejí prohlubně připomínající misky (řecký kalich), proto byl virus původně zařazen do čeledi Caliciviridae (rod Hepavirus). Podrobnější studie genomu HEV ukázala, že nukleotidová sekvence jeho RNA je unikátní a má jen určitou podobnost s virem zarděnek.

HEV je v současnosti klasifikován jako člen čeledi Hepereviridae, rodu Heperevirus, viru hepatitidy E.

Antigen(y) HEV - HEV Ag byl identifikován na povrchu virových částic pomocí imunologické elektronové mikroskopie, v hepatocytech imunohistochemickými metodami. U experimentálních zvířat (makaků a šimpanzů) trpících hepatitidou E byl HEV Ag detekován v cytoplazmě hepatocytů pomocí imunofluorescenční metody při vrstvení jaterních řezů se séry od stejných zvířat získanými během rekonvalescenčního období; specificita HEV Ag byla následně potvrzena v absorpčních studiích s použitím rekombinantních proteinů získaných klonováním genomu HEV.

V imunomorfologických studiích opic infikovaných hepatitidou E byly v cytoplazmě hepatocytů lokalizovány granulární depozita HEV Ag, přičemž granule obsahující HEV Ag byly umístěny náhodně a počet granulí se v různých buňkách významně lišil. Nebyla zjištěna žádná preferenční lokalizace HEV Ag-pozitivních hepatocytů v žádné konkrétní zóně jaterního lalůčku. Hepatitida obsahující HEV Ag byla konstantně detekována před zvýšením aktivity ALT, poté přetrvávala po celou dobu hyperenzyémie a po normalizaci aktivity ALT prakticky vymizela.

Genomové sekvence HEV byly identifikovány ve stolici, žluči a krevním séru pacientů s hepatitidou E u lidí a experimentálních zvířat (opic); humorální imunitní odpověď byla studována od akutního stádia onemocnění až do rekonvalescence.

Nejvyšší koncentrace částic HEV byla detekována ve žluči infikovaných makaků před vrcholem aktivity ALT ve stádiu infekce, kdy byl zaznamenán vrchol přítomnosti HEV Ag v játrech.

RNA HEV byla nalezena ve vzorcích stolice, žluči a séra infikovaných lidí a primátů.

Přítomnost specifických protilátek (anti-HEV) v krevním séru pacientů s hepatitidou E u lidí a experimentálních zvířat byla stanovena pomocí imunoelektronové mikroskopie a metody fluorescenčních protilátek s použitím preparátů HEV částic nebo jaterních řezů obsahujících HEV Ag jako substrát.

Další průřezové studie izolátů HEV a rekonvalescentních sér získaných od pacientů v různých geografických oblastech, kde se vyskytly ohniska nebo sporadické případy hepatitidy E, jakož i částic HEV a sér získaných od primátů infikovaných těmito izoláty, nakonec přesvědčily badatele, že existuje jediný virus (nebo třída sérologicky příbuzných virů) celosvětově zodpovědný za hepatitidu E.

Je ukázána genotypová diverzita viru HEV. Bylo identifikováno osm genotypů viru, jejichž hlavními prototypy byly následující izoláty: genotyp 1 - izolát HEV z Barmy, 2 - z Mexika, 3 - z USA, 4 - z Tchaj-wanu a Číny, 5 - z Itálie, 6 - z Řecka, 7 - z Řecka (druhý izolát), 8 - z Argentiny.

Bylo prokázáno, že v akutním stádiu hepatitidy E u makaků a šimpanzů cirkulují v krevním séru protilátky proti HEV tříd IgM a IgG, zatímco v sérech rekonvalescenčního období cirkulují pouze protilátky proti HEV třídy

V řadě studií byly protilátky IgM proti HEV detekovány u 73 % pacientů s hepatitidou E v prvních 26 dnech od nástupu žloutenky; během období rekonvalescence byly protilátky IgG proti HEV detekovány u 90 % pacientů.

Zdrojem infekce je pouze člověk, patogen se vylučuje stolicí. Mechanismus infekce je fekálně-orální. Hlavní cestou infekce je voda kontaminovaná stolicí. Infekční dávka je výrazně vyšší než u viru hepatitidy A. Náchylnost k viru HEV je univerzální. Epidemie mohou postihnout desítky tisíc lidí, pokud je porušen pitný režim, zejména při sezónních pracích v létě a na podzim.

Klinicky je hepatitida E mírnější než hepatitida A a přechod do chronické formy nebyl zaznamenán. U 85–90 % pacientů je hepatitida E mírná nebo středně těžká, často asymptomatická. U těhotných žen je však hepatitida E závažná s úmrtností až 20 %.

Pro diagnostiku se používá imunitní elektronová mikroskopie; byl navržen testovací systém pro detekci protilátek proti antigenům HEV. Postinfekční imunita je silná, celoživotní a je způsobena protilátkami neutralizujícími virus a imunitními paměťovými buňkami. Pro specifickou profylaxi byla navržena vakcína s celými viry a vyvíjejí se živé a rekombinantní vakcíny.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]