Elektroforetická analýza lipoproteinů

Lipoproteiny krevní plazmy jsou transportní formou lipidů v lidském těle. Transportují lipidy exogenního (potravního) i endogenního původu. Některé lipoproteiny zachycují přebytečný cholesterol z buněk periferních tkání a transportují ho do jater, kde se oxiduje na žlučové kyseliny a vylučuje žlučí. Za účasti lipoproteinů se transportují také vitamíny rozpustné v lipidech a hormony.

Plazmatické lipoproteiny mají kulovitý tvar. Uvnitř se nachází tuková „kapka“ obsahující nepolární lipidy (triglyceridy a esterifikovaný cholesterol) a tvořící jádro LP částice. Je obklopena vrstvou fosfolipidů, neesterifikovaného cholesterolu a bílkovin.

Existuje několik metod pro stanovení lipoproteinů v krvi. Jednou z nich je stanovení obsahu cholesterolu v různých třídách lipoproteinů – o nichž jsme hovořili výše. Další metodou pro studium obsahu lipoproteinů je elektroforetická. Při použití této metody se jednotlivé frakce lipoproteinů klasifikují porovnáním jejich elektroforetické mobility s mobilitou normálních sérových proteinů. Na základě elektroforetické mobility byly lipoproteiny rozděleny do následujících frakcí.

• Chylomikrony. Při elektroforéze zůstávají chylomikrony na začátku (obsahují velmi málo bílkovin) podobně jako γ-globuliny; jsou to částice bohaté na tuky, které vstupují do krve z lymfy a transportují triglyceridy z potravy. Jsou to největší lipoproteiny. Krevní plazma zdravých lidí, kteří nejedli 12–14 hodin, chylomikrony neobsahuje nebo je obsahuje v zanedbatelném množství.
• Alfa lipoproteiny. Během elektroforézy se α-LP pohybují společně s alfa globuliny a odpovídají HDL. HDL obsahuje až 50 % bílkovin, přibližně 30 % fosfolipidů, 20 % cholesterolu a velmi málo triglyceridů. Vznikají v játrech a stěně tenkého střeva.
• Beta lipoproteiny. Během papírové elektroforézy se beta LP pohybují společně s beta globuliny a odpovídají LDL. LDL obsahuje 25 % bílkovin, 50 % cholesterolu, 20 % fosfolipidů a 8–10 % triglyceridů. Předpokládá se, že LDL vzniká částečně nebo úplně rozpadem lipoproteinů s velmi nízkou hustotou (VLDL).
• Pre-beta lipoproteiny. Během elektroforézy se mezi alfa-lipoproteiny a beta-lipoproteiny objevují pre-beta lipoproteiny, odpovídají VLDL.

Elektroforéza lipoproteinů umožňuje kvalitativní analýzu lipoproteinů. Existují dva metabolické procesy, které určují patogenezi aterosklerózy: rychlost infiltrace lipoproteinů bohatých na cholesterol do vnitřní vrstvy cévní stěny a rychlost odstraňování cholesterolu z cév s následným vyloučením z těla. V tomto vyváženém systému určují zvýšené koncentrace chylomikronů, VLDL a LDL riziko nadměrného ukládání cholesterolu uvnitř cévní stěny. Na druhou stranu zvýšené koncentrace HDL přispívají ke zvýšené rychlosti odstraňování cholesterolu z aterosklerotických plaků. LP elektroforéza může poskytnout další informace o vztahu mezi těmito metabolickými procesy.

Kromě výše zmíněných tříd lipoproteinů lze v krevní plazmě nalézt i další lipoproteinové komplexy, včetně neobvyklých, které se nazývají patologické (nebo podmíněně patologické) lipoproteiny. Patří mezi ně β-VLDL, HDL- _cholesterol a LP-C. β-VLDL, nazývané také plovoucí β-LP, se vyznačují elektroforetickou mobilitou vlastní β-LP a hustotou odpovídající VLDL, díky čemuž plovou během ultracentrifugace společně s VLDL. Přítomnost β-VLDL je charakteristickým rysem DLP typu III. HDL- _cholesterol je frakce HDL přetížená cholesterolem; role těchto lipoproteinů v patogenezi aterosklerózy nebyla objasněna. LP-C se vyznačuje vysokým obsahem fosfolipidů (65-68 %) a neesterifikovaného cholesterolu (23-27 %). Vzhledem ke své vysoké rigiditě přispívají LP-X ke zvýšení viskozity krve. Objevují se v krvi při obstrukční žloutence a při deficitu lecitin-cholesterol acyltransferázy. Úloha LP-X ve vývoji aterosklerózy nebyla studována.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]