Agregace krevních destiček pomocí ristocetinu (von Willebrandův faktor )

Referenční hodnoty (norma) aktivity von Willebrandova faktoru jsou 58–166 %.

Von Willebrandův faktor je syntetizován endotelovými buňkami a megakaryocyty. Je nezbytný pro normální adhezi krevních destiček a má schopnost prodloužit poločas faktoru VIII. Plazmatický koagulační faktor VIII – antihemofilní globulin A – cirkuluje v krvi jako komplex tří podjednotek označených VIII-k (koagulační jednotka), VIII-Ag (hlavní antigenní marker) a VIII-vWF (von Willebrandův faktor asociovaný s VIII-Ag). Předpokládá se, že von Willebrandův faktor reguluje syntézu koagulační části antihemofilního globulinu A (VIII-k) a podílí se na vaskulárně-destičkové hemostáze.

Von Willebrandova choroba je dědičné onemocnění charakterizované prodlouženou dobou krvácení, sníženou aktivitou ristocetinového kofaktoru a sníženou (v různé míře) koagulační aktivitou faktoru VIII. Klinické projevy onemocnění jsou podobné jako u trombocytopatie. U pacientů s významně sníženou aktivitou faktoru VIII se však mohou objevit hematomy a hemartróza.

Na základě laboratorních studií, které nám umožňují určit strukturu a aktivitu von Willebrandova faktoru, se rozlišují následující formy onemocnění.

• Typ I (70 % všech případů) je charakterizován mírným snížením ristocetinového kofaktoru (von Willebrandův faktor) a koagulační aktivity (VIII-k) s normální makromolekulární strukturou von Willebrandova faktoru.
• Typ II: je založen na selektivním deficitu vysokomolekulárních polymerů von Willebrandova faktoru v důsledku poruch struktury tohoto proteinu.
  • Typ IIB je způsoben zvýšenou interakcí mezi von Willebrandovým faktorem a krevními destičkami a zvýšená clearance agregátů krevních destiček vede k trombocytopenii.
• Typ III je charakterizován těžkým kvantitativním deficitem von Willebrandova faktoru, což vede ke klinicky významnému snížení aktivity faktoru VIII (VIII-k).

Obsah von Willebrandova faktoru se stanovuje v případech, kdy je doba krvácení zvýšená, počet krevních destiček je v rámci referenčních hodnot a nejsou zjevné příčiny dysfunkce krevních destiček. Pro posouzení von Willebrandova faktoru se stanoví kvantitativní obsah von Willebrandova faktoru (studie aktivity kofaktoru ristocetinu), studuje se ristocetinem indukovaná aglutinace krevních destiček a antigenní struktura von Willebrandova faktoru asociovaného s faktorem VIII (VIII-vWF).

Stanovení agregace krevních destiček s ristocetinem v plazmě se používá pro kvantitativní hodnocení von Willebrandova faktoru. Mezi stupněm agregace ristocetinu a množstvím von Willebrandova faktoru byl stanoven lineární vztah. Metoda je založena na schopnosti tohoto antibiotika (ristocetinu) stimulovat in vitro interakci von Willebrandova faktoru s destičkovým glykoproteinem Ib. Ve většině případů von Willebrandovy choroby je pozorována porušená agregace ristocetinu při normální reakci na ADP, kolagen a adrenalin. Porušená agregace ristocetinu je detekována také u Bernard-Soulierovy makrocytární trombodystrofie (absence receptorů pro agregaci ristocetinu na membráně krevních destiček). Pro diferenciaci se používá test s přídavkem normální plazmy: u von Willebrandovy choroby se agregace ristocetinu normalizuje po přídavku normální plazmy, zatímco u Bernard-Soulierova syndromu se tak neděje.

Studie může být také využita v diferenciální diagnostice hemofilie A (nedostatek faktoru VIII) a von Willebrandovy choroby. U hemofilie je obsah VIII-k prudce snížen a obsah VIII-fB je v normálním rozmezí. Klinicky se tento rozdíl projevuje tím, že u hemofilie se vyskytuje hematomový typ zvýšeného krvácení a u von Willebrandovy choroby petechiálně-hematomový typ.

Aglutinace krevních destiček indukovaná ristocetinem je snížena ve většině případů von Willebrandovy choroby, s výjimkou typu IIB.

Antigenní struktura von Willebrandova faktoru asociovaného s faktorem VIII (VIII-vWF) se detekuje různými imunologickými metodami a distribuce von Willebrandova faktoru podle molekulární velikosti se stanoví elektroforézou na agarózovém gelu. Tyto testy se používají k určení typu von Willebrandovy choroby.

Studium agregace krevních destiček s různými induktory se provádí nejen za účelem identifikace poruch funkcí agregace krevních destiček. Tato studie umožňuje vyhodnotit účinnost antiagregační terapie, zvolit individuální dávky léků a provést monitorování léků.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]