Test na malárii (malarické plasmodie v krvi)

Plazmodie v krevním nátěru zdravých lidí chybí. Malarické plazmodie střídavě parazitují ve 2 hostitelích: v těle samice komára rodu Anopheles, kde dochází k pohlavnímu rozmnožování, sporogonii, a v lidském těle, kde dochází k nepohlavnímu rozmnožování, schizogonii. Počáteční fáze schizogonie probíhá v hepatocytech (extraerytrocytární schizogonie), následná - v erytrocytech (erytrocytární schizogonie). Plazmodie se vyvíjejí v erytrocytech, živí se hemoglobinem a ničí postižené erytrocyty. Všechny patologické projevy malárie [záchvaty horečky, anémie, splenomegalie, poškození centrálního nervového systému (CNS) u tropické formy malárie] jsou spojeny s erytrocytární schizogonií.

Existují 4 typy plazmodií:

• P. falciparum je původcem tropické horečky, nejnebezpečnější formy malárie, která vyžaduje neodkladnou léčbu. U P. falciparum začíná erytrocytární schizogonii v periferním krevním řečišti a končí v centrálním krevním řečišti v důsledku zadržování postižených erytrocytů v kapilárách vnitřních orgánů. V důsledku toho jsou na začátku infekce v krevních produktech přítomny pouze mladé trofozoity („kroužky“). Gametocyty jsou po dozrání v kapilárách vnitřních orgánů detekovány v periferní krvi 10.–12. den onemocnění. Detekce dospělých trofozoitů nebo schizontů jakéhokoli věku v periferní krvi naznačuje nástup maligního průběhu tropické malárie a bezprostřední smrtelný výsledek, pokud nebudou přijata neodkladná opatření. U jiných typů malárie se erytrocytární schizogonii vyskytuje výhradně v periferním krevním řečišti. Na rozdíl od jiných typů plazmodií nejsou gametocyty P. falciparum kulatého, ale podlouhlého tvaru a mají dlouhou životnost. Umírají během 2-6 týdnů (jiné typy - během 1-3 dnů), takže detekce gametocytů P. falciparum po mnoho dní po vyléčení pacienta (ukončení erytrocytární schizogonie) v důsledku působení schizonticidních léků je běžným jevem, který se nepovažuje za indikátor neúčinnosti terapie.
• P. vivax je původcem třídenní malárie.
• P. malariae - původce kvartánové malárie
• P. ovale je původcem ovalové malárie (třídenní typ).

Cyklus erytrocytární schizogonie se u P. falciparum, P. vivax a P. ovale opakuje každých 48 hodin a u P. malariae 72 hodin. Malarické ataky se rozvíjejí v té fázi cyklu erytrocytární schizogonie, kdy je většina postižených erytrocytů zničena a dceřiné jedince plazmodií (merozoitů) uvolněné z nich napadají intaktní erytrocyty.

Pro stanovení druhové příslušnosti malarických parazitů je důležité: přítomnost polymorfismu věkových stádií nebo jednoho vedoucího stádia, jejich kombinace s gametocyty; morfologie různých věkových stádií, jejich velikosti ve vztahu k postiženému erytrocytu; charakter, velikost jádra a cytoplazmy; intenzita pigmentu, jeho tvar, velikost zrn/granul; počet merozoitů u zralých schizontů, jejich velikost a umístění ve vztahu k akumulaci pigmentu; tendence parazita postihovat erytrocyty určitého stáří (tropismus); tendence k mnohočetnému poškození jednotlivých erytrocytů několika parazity a její intenzita; velikost postižených erytrocytů ve vztahu k nepostiženým, tvar postižených erytrocytů, přítomnost azurofilní granularity v postižených erytrocytech; tvar gametocytů.

Během akutních záchvatů malárie se pozoruje určitý vzorec změn v krvi. Během zimnice se objevuje neutrofilní leukocytóza s posunem doleva. Během horečky se počet leukocytů mírně snižuje. S výskytem potu a apyrexie se zvyšuje monocytóza. Později, po 2-4 záchvatech, se objevuje anémie, která se rozvíjí zejména brzy a rychle při tropické horečce. Anémie má převážně hemolytický charakter a je doprovázena zvýšením obsahu retikulocytů. V krevních nátěrech se nachází poikilocytóza, anizocytóza a polychromatofilie erytrocytů. S přidáním suprese kostní dřeně se počet retikulocytů snižuje. Někdy se pozoruje obraz perniciózní anémie. S malárií se významně zvyšuje ESR.

Během interiktálního (afebrilního) období převládají v krvi dospělé trofozoity u všech forem malárie kromě tropické malárie. Během tohoto období onemocnění jsou v krvi neustále přítomna určitá stádia plazmodií, a to až do úplného ukončení erytrocytární schizogonie. V tomto ohledu není nutné odebírat krev k vyšetření pouze na vrcholu malarického záchvatu, ale lze ji testovat kdykoli. Absence malarických plazmodií v krevních nátěrech a silné kapce pacienta s malárií odráží pouze důkladnost studie a odbornou způsobilost laboratorního specialisty.

Při hodnocení intenzity parazitémie se bere v úvahu celkový počet nepohlavních a pohlavních forem, s výjimkou P. falciparum. Intenzita parazitémie se posuzuje pomocí „tlusté kapky“ na 1 μl krve. Počet parazitů se počítá ve vztahu k určitému počtu leukocytů. Při detekci 10 a více parazitů na 200 leukocytů se počítání zastaví. Při detekci 9 a méně parazitů na 200 leukocytů se v počítání pokračuje, aby se stanovil počet parazitů na 500 leukocytů. Při detekci jednotlivých parazitů v „tlusté kapce“ krve se jejich počet počítá na 1000 leukocytů. Počet parazitů v 1 μl krve se stanoví pomocí následujícího vzorce: X = A × (B / C), kde: X je počet parazitů v 1 μl krve; A je spočítáný počet parazitů; B je počet leukocytů v 1 μl krve; C - spočítáný počet leukocytů.

V případech, kdy není možné stanovit počet leukocytů u daného pacienta, se jejich počet v 1 µl podle doporučení WHO obvykle bere jako roven 8000.

Účinnost léčby se sleduje vyšetřením husté kapky krve s počtem parazitů v 1 μl krve. Test by měl být prováděn denně od 1. do 7. dne od zahájení chemoterapie. Pokud paraziti během tohoto období vymizí, provádí se další krevní testy 14., 21. a 28. den od zahájení léčby. Pokud je zjištěna rezistence (posouzena úrovní parazitémie) a podle toho neúčinnost léčby, je antimalarika nahrazena specifickým lékem jiné skupiny a krevní test se provádí podle stejného schématu.

Pacienti, kteří prodělali tropickou malárii, jsou po dobu 1–2 měsíců dispenzárně sledováni a v intervalech 1–2 týdnů se jim provádějí parazitologické krevní testy. Pacienti, kteří prodělali malárii způsobenou P. vivax, P. ovale a P. malariae, by měli být sledováni po dobu 2 let. Jakékoli zvýšení tělesné teploty u těchto jedinců vyžaduje laboratorní krevní testy k detekci malarických plazmodií.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]