Lékařský expert článku
Nové publikace
Southern blotting
Naposledy posuzováno: 05.07.2025
Veškerý obsah iLive je lékařsky zkontrolován nebo zkontrolován, aby byla zajištěna co největší věcná přesnost.
Máme přísné pokyny pro získávání zdrojů a pouze odkaz na seriózní mediální stránky, akademické výzkumné instituce a, kdykoli je to možné, i klinicky ověřené studie. Všimněte si, že čísla v závorkách ([1], [2] atd.) Jsou odkazy na tyto studie, na které lze kliknout.
Pokud máte pocit, že některý z našich obsahů je nepřesný, neaktuální nebo jinak sporný, vyberte jej a stiskněte klávesu Ctrl + Enter.
Southern blotting (vyvinutý E. Southernem a R. Davisem v roce 1975) je hlavní metodou, která se v současnosti používá k identifikaci genů pro konkrétní onemocnění. Za tímto účelem se z buněk pacienta extrahuje DNA a ošetří se jednou nebo více restrikčními endonukleázami. Výsledné fragmenty se podrobí elektroforéze, která umožňuje jejich oddělení podle velikosti (menší fragmenty se rychleji pohybují póry gelu). Fragmenty se poté přenesou (znovu natisknou) na nitrocelulózový filtr, na který se nanese radioaktivně značená sonda. Sonda se váže pouze na komplementární sekvenci. Poté se pomocí autoradiografie určí poloha požadovaného fragmentu genomové DNA na elektroferogramu.
Hybridizace se značenou DNA sondou preparátů DNA nebo RNA nanesených po kapkách na pevnou matrici bez předchozí restrikce a elektroforézy se nazývá bodová nebo štěrbinová hybridizace, v závislosti na konfiguraci DNA skvrny na filtru (kulatá nebo podlouhlá).
[