Rhabdoviry jsou původci vztekliny a vezikulární stomatitidy

Vzteklina je akutní infekční onemocnění způsobené rhabdovirem, které se objevuje po kousnutí nemocným zvířetem nebo při kontaktu slin nemocného zvířete s poškozenou kůží či sliznicemi. Tato infekce centrálního nervového systému je téměř vždy smrtelná.

První zmínky o nemoci přenášené kousnutím psem, která je svým popisem velmi podobná vzteklině, se nacházejí v klínovitých hliněných tabulkách starověké Mezopotámie, datovaných do 3. tisíciletí př. n. l. Virus izoloval a atenuoval v roce 1882 I. Pasteur pasážováním na mozku králíka.

Vezikulární stomatitida – onemocnění koní, skotu a prasat, někdy i lidí, které probíhá nezhoubně – je také způsobena rhabdovirem. Tento virus je pro člověka slabě patogenní. Byl prozkoumán lépe než všechny rhabdoviry.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ]

Životní cyklus

Rhabdoviry jsou čeleď, která zahrnuje tři rody: Vesiculovirus (10 savčích virů, typickým je virus vezikulární stomatitidy neboli VSV); yssavirus (6 sérologicky příbuzných virů, typickým je virus vztekliny); Sigmavirus (jediným zástupcem je virus sigma-drozofily). Šest virů, které způsobují onemocnění ryb, a 13 virů, které postihují rostliny, zůstává neklasifikováno. Rhabdoviry se vyznačují tyčinkovitým nebo kulovitým virionem: 60–400 nm dlouhý a 60–85 nm široký. Částice jsou obklopeny dvouvrstvou lipidovou membránou podobnou membráně s vyčnívajícími hroty o délce 10 nm a šířce 3 nm. Pod membránou se nachází ribonukleokapsida se spirálovým typem symetrie, na které jsou pod elektronovým mikroskopem viditelné pruhy. Genom rhabdovirů je reprezentován negativní jednovláknovou lineární nefragmentovanou molekulou RNA s molekulovou hmotností 3,8 MDa; Bylo nalezeno pět genů kódujících syntézu strukturních proteinů a bylo stanoveno pořadí jejich uspořádání. Na 3'-konci se nachází gen nukleokapsidového proteinu N (50 kDa). Následuje gen proteinu NSV (30 kDa), jedné ze složek virové transkriptázy, která je součástí nukleokapsidy. Další gen kóduje matrixový protein M (30 kDa) vystýlající zevnitř dvojvrstvou lipidovou membránu. Dále následuje gen proteinu G (65 kDa), vnějšího glykoproteinu virové superkapsidy. Na 5'-konci se nachází gen vysokomolekulární složky virové transkriptázy, proteinu L (160 kDa).

Interakce rhabdovirů s buňkami a jejich reprodukce probíhá podle následujícího schématu: adsorpce viru na buňce (glykoprotein G) - průnik do buňky endocytózou - fúze s membránou lysozomu - deproteinizace viru. Působením virionové transkriptázy (RNA polymerázy) se tvoří cRNA, která slouží jako matrice pro syntézu vRNA a plní funkci mRNA. Poté se na ribozomech hostitelské buňky syntetizují virově specifické proteiny. Proteiny M a G jsou uloženy v plazmatické membráně. Nukleokapsida vzniklá interakcí vRNA s proteiny N, L a NS, procházející membránou, je obalena superkapsidou. Zralý virion se od buňky odděluje pučením.

Virus vztekliny je svou strukturou a vlastnostmi intracelulární reprodukce velmi podobný viru vezikulární stomatitidy. Důležitým rysem těchto virů je výrazná inhibice procesů biosyntézy proteinů v hostitelské buňce blokováním zahájení translace. Existuje několik sérovariant virů vezikulární stomatitidy, které se liší v G proteinu, který je zároveň ochranným antigenem.

Viry se dobře množí v kuřecích embryích, buňkách ledvin novorozených křečků a v lidských diploidních buněčných kulturách. V buněčných kulturách virus vezikulární stomatitidy obvykle způsobuje cytopatické účinky a buněčnou smrt a někdy i symplastogenezi.

Virus vztekliny má široké spektrum hostitelů. Všichni teplokrevní živočichové jsou na něj citliví. Stupeň patogenity různých kmenů virů vztekliny pro různá zvířata není stejný. U některých druhů netopýrů se virus adaptoval pouze na slinné žlázy, aniž by způsoboval příznaky onemocnění; infekce jiných zvířat vždy vede k úmrtí.

Kmeny virů vztekliny kolující v přírodě mezi zvířaty se nazývají pouliční kmeny. Způsobují onemocnění s poměrně dlouhou inkubační dobou a obvykle tvoří specifická inkluzní tělíska v cytoplazmě buněk. Nakažená zvířata mohou zažívat dlouhé období neklidu a agresivity. Virus může proniknout do slinných žláz a centrálního nervového systému. Postupné pasáže v mozku králíků vedou k tvorbě fixovaného viru, který se není schopen dále reprodukovat v žádných buňkách kromě nervových. Fixovaný virus se rychle reprodukuje, inkubační doba je krátká, inkluze v buňkách se nacházejí jen zřídka. Tento virus je patogenní pouze pro králíky.

Virus vztekliny není ve vnějším prostředí příliš stabilní, rychle se inaktivuje vystavením ultrafialovým paprskům nebo slunečnímu záření. Při vaření hyne po 2 minutách, při 60 °C - po 5 minutách. Rychle se inaktivuje roztoky lysolu, chloraminu, fenolu, rozpouštědel tuků a trypsinu. V mrtvolách zvířat, zejména při nízkých teplotách, přežívá až 4 měsíce.

Imunita

Vzhledem k tomu, že vzteklina je smrtelná, nebyla postinfekční imunita studována. Bylo zjištěno, že protilátky se mohou tvořit během onemocnění a po očkování. Postvakcinační imunita trvá až 1 rok.

Epidemiologie vztekliny

Vzteklina je typické zoonotické onemocnění. Hlavním zdrojem a rezervoárem viru jsou divocí i domácí masožravci: psi, kočky, vlci, šakali, lišky, skunkové, mangusty, netopýři. Nemoc se obvykle přenáší kousnutím nebo sliněním na poškozené kůži či sliznicích, protože se virus množí ve slinných žlázách zvířete. Nemocné zvíře je nakažlivé nejen během nemoci, ale i během inkubační doby 2–3 dny, někdy i déle, než se objeví první příznaky onemocnění.

[ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Příznaky vztekliny

Primární reprodukce viru vztekliny probíhá ve svalové tkáni v blízkosti vstupních bran, poté patogen proniká do receptorů periferních senzorických nervů a přes endoneurium Schwannových buněk nebo perineurální prostory se dostává do centrálního nervového systému. Tam se virus reprodukuje v neuronech hipokampu, prodloužené míchy, hlavových nervů a sympatických ganglií, což způsobuje zánětlivé, dystrofické a nekrotické změny v nervovém systému. Během tohoto období se virus reprodukuje také v buňkách slinných žláz.

Nejkratší inkubační doba nastává u kousnutí do hlavy a rukou, delší - u kousnutí do dolních končetin; obecně se pohybuje od 8 do 90 dnů. Ve vývoji onemocnění se rozlišují tři fáze: prekurzory (deprese), excitace, paralýza. Nejprve se objevuje úzkost, strach, úzkost, nepříjemné pocity v oblasti kousnutí. Po 1-3 dnech se objevuje výrazné excitace, křeče dýchacích a polykacích svalů, objevuje se výrazná hydrofobie (hydrofobie je druhý název pro toto onemocnění). Pro toto období je charakteristická agrese, sluchové a zrakové halucinace. Poté se rozvine paralýza a po 5-7 dnech od začátku onemocnění dochází k úmrtí na paralýzu srdečního nebo dýchacího centra.

Laboratorní diagnostika vztekliny

Vzteklina se diagnostikuje pomocí viroskopických, biologických a sérologických metod. Mozková tkáň (mozková kůra a mozeček, Ammonův roh, prodloužená mícha) a tkáň slinných žláz se vyšetřují v histologických řezech nebo nátěrech uhynulých zvířat a lidí. V pyramidálních buňkách mozkové tkáně se nacházejí specifické eozinofilní inkluze (Babesh-Negriho tělíska). Jsou umístěny v cytoplazmě v blízkosti jádra a jedná se o shluky virových nukleokapsid. Jejich výskyt je způsoben obtížným zráním virionů v nervových buňkách. Babesh-Negriho tělíska se detekují pomocí speciálních barvicích metod (Romanovsky-Giemsa, Mann, Turevich, Muromtsev atd.). Mají charakteristickou zrnitou strukturu s bazofilními granulemi na acidofilním pozadí, jejich velikost je 4-10 μm. Nevýhodou této metody je, že ji lze použít až po úmrtí člověka nebo zvířete.

Virový antigen lze ve stejných preparátech detekovat pomocí přímé nebo nepřímé imunofluorescenční reakce.

Virus vztekliny lze izolovat ze slin nemocných lidí nebo zvířat, stejně jako z čerstvého pitevního materiálu (mozková tkáň, tkáň submandibulárních slinných žláz) intracerebrální infekcí bílých myší a králíků nebo křečků - intramuskulárně. U zvířat dochází k paralýze a následné smrti. Mozek uhynulého zvířete by měl být vyšetřen k detekci Babes-Negriho tělísek nebo virového antigenu pomocí imunofluorescenční reakce.

Protilátky lze u očkovaných jedinců detekovat pomocí neutralizace, fixace komplementu, imunofluorescence a imunosorbentních reakcí (RIM a IFM).

Specifická prevence a léčba vztekliny

Prevence vztekliny spočívá v boji proti vzteklině u zvířat a v prevenci rozvoje onemocnění u lidí, které pokousalo nebo olízalo nemocné zvíře. Program eliminace vztekliny u suchozemských zvířat je třeba posuzovat ve dvou ohledech:

1. eradikace vztekliny u psů ve městech a
2. zlepšení přirozených ložisek infekce vzteklinou.

Zkušenosti mnoha zemí přesvědčivě dokazují možnost kontroly městských epizootií registrací a imunizací psů. Pro úplnou eliminaci infekce vzteklinou je však nutné zlepšit její přirozená ohniska a vyhubení divokých masožravců dává pouze dočasný a lokální výsledek a hrozí rozvojem nežádoucích environmentálních důsledků. V zahraničí již existují velké pozitivní zkušenosti s prevencí vztekliny u divokých zvířat (lišky, mývalové) krmením návnadami obsahujícími vakcínu. Perorální vakcíny proti vzteklině jsou v tomto ohledu považovány za velmi slibné: živá modifikovaná celovirionová vakcína z atenuovaných vakcinačních kmenů (SAD-Bern, Vnukovo-32) a rekombinantní geneticky modifikovaná perorální vakcína využívající virus vakcínie jako vektor exprimující gen G-proteinu viru vztekliny.

V případě kousnutí nebo slintaní je nutné ránu nebo kůži v místě kontaktu se slinami důkladně omýt mýdlovou vodou, ránu kauterizovat alkoholovým roztokem jódu a zahájit specifickou profylaxi vakcínou proti vzteklině a gamaglobulinem proti vzteklině. Místo dříve používané vysoce reaktogenní Fermiho vakcíny (z mozkové tkáně ovcí infikovaných fixním virem) se nyní k prevenci onemocnění doporučuje inaktivovaná kultivační vakcína proti vzteklině, která se vyrábí na buněčné kultuře infikované atenuovaným virem vztekliny (kmen Vnukovo-32). Nouzové terapeutické a profylaktické očkování se provádí vakcínou nebo vakcínou v kombinaci s gamaglobulinem proti vzteklině podle schémat uvedených v návodu k jejich použití. Schéma očkování je určeno závažností kousnutí, jeho lokalizací, dobou uplynulou od kousnutí, informacemi o kousajícím zvířeti a dalšími okolnostmi.