Protilátky proti nukleárním antigenům (antinukleární faktor) v krvi

U zdravých lidí je titr protilátek proti jaderným antigenům v krevním séru 1:40-1:80 (klinicky významný titr je ≥1:160 při použití metody nepřímé imunofluorescence; při použití screeningových metod - pod 1:50).

Antinukleární faktor - protilátky proti celému jádru. Jedná se o heterogenní skupinu autoprotilátek, které reagují s různými složkami jádra. Stanovení protilátek proti jaderným antigenům v krevním séru je test na systémová onemocnění pojivové tkáně. Screening na přítomnost antinukleárních protilátek v krevním séru se provádí radioimunoanalýzou (RIA), reakcí fixace komplementu (CFR) nebo ELISA.

Pozitivní výsledky screeningu by měly být potvrzeny metodou nepřímé imunofluorescence. Jako buněčný substrát se používají preparáty připravené ze suspenze buněk s velkými jádry [z lidských epiteliálních buněk linie HEp-2 - buňky rakoviny hrtanu, nebo řezy myších jater]. Typ barvení (povaha distribuce fluorescenční značky v buňkách) je u různých onemocnění odlišný a určuje směr dalšího stanovení specificity antinukleárních protilátek.

• Difúzní barvení (rovnoměrné rozložení značení) je nejméně specifické, možné u systémového lupus erythematodes, syndromu lupusu vyvolaného léky a dalších autoimunitních onemocnění, stejně jako u starších jedinců. V případě difúzního barvení buněk je nutné reakci opakovat s vyšším ředěním testovaného krevního séra. Pokud typ barvení zůstane stejný, je nejpravděpodobnější, že antigenem, proti kterému jsou antinukleární protilátky namířeny, je deoxyribonukleoprotein.
• Homogenní nebo periferní barvení se pozoruje, když v zkoumaném séru převládají protilátky proti dvouvláknové DNA. Tento typ barvení se nejčastěji vyskytuje u systémového lupus erythematodes.
• Skvrnité nebo skvrnité zbarvení je způsobeno protilátkami proti extrahovatelným jaderným antigenům a obvykle se vyskytuje u smíšených onemocnění pojivové tkáně, Sjögrenova syndromu a lékově indukovaného lupusového syndromu.
• Nukleolární barvení (distribuce značení v jadérkách) je způsobeno protilátkami proti ribonukleoproteinu (viz níže). Tento typ barvení je typický pro systémovou sklerodermii a občas je možný i u jiných autoimunitních onemocnění.
• Centromerické nebo diskrétní skvrnité barvení je způsobeno protilátkami proti centromeře (specializované doméně chromozomů) a je charakteristické pro CREST syndrom a další autoimunitní revmatická onemocnění.

Hlavním cílem studie antinukleárních protilátek je identifikace systémového lupus erythematodes, protože u tohoto onemocnění se objevují v krevním séru 95 % pacientů do 3 měsíců od jeho nástupu.

Stanovení protilátek proti nukleárním antigenům má velký význam pro diagnostiku kolagenóz. U nodulární polyarteritidy se titr (při použití screeningových metod) může zvýšit na 1:100, u dermatomyozitidy na 1:500, u systémového lupus erythematodes na 1:1000 a vyšší. U systémového lupus erythematodes má test na detekci antinukleárního faktoru vysoký stupeň senzitivity (89 %), ale střední specificitu (78 %) ve srovnání s testem na detekci protilátek proti nativní DNA (senzitivita 38 %, specificita 98 %). Protilátky proti nukleárním antigenům jsou pro systémový lupus erythematodes vysoce specifické. Dlouhodobé udržování vysoké hladiny protilátek je nepříznivým znakem. Pokles titru předpovídá remisi nebo (někdy) fatální výsledek.

U sklerodermie je frekvence detekce protilátek proti jaderným antigenům 60-80 %, ale jejich titr je nižší než u systémového lupus erythematodes. Neexistuje žádný vztah mezi titrem antinukleárního faktoru v krvi a závažností onemocnění. U revmatoidní artritidy se často rozlišují formy onemocnění podobné SLE, takže protilátky proti jaderným antigenům jsou detekovány poměrně často. U dermatomyozitidy jsou protilátky proti jaderným antigenům v krvi detekovány ve 20-60 % případů (titr až 1:500), u nodulární polyarteritidy - v 17 % (1:100), u Sjögrenovy choroby - v 56 % v kombinaci s artritidou a v 88 % případů u Gougerot-Sjögrenova syndromu. U diskoidního lupus erythematodes je antinukleární faktor detekován u 50 % pacientů.

Kromě revmatických onemocnění jsou protilátky proti jaderným antigenům v krvi detekovány u chronické aktivní hepatitidy (v 30–50 % případů) a jejich titr někdy dosahuje 1:1000. Autoprotilátky proti jaderným antigenům se mohou v krvi objevit u infekční mononukleózy, akutní a chronické leukémie, získané hemolytické anémie, Waldenströmovy choroby, jaterní cirhózy, biliární cirhózy, hepatitidy, malárie, lepry, chronického selhání ledvin, trombocytopenie, lymfoproliferativních onemocnění, myastenie a thymomů.

V téměř 10 % případů je antinukleární faktor detekován u zdravých lidí, ale v nízkých titrech (ne více než 1:50).

V posledních letech byla vyvinuta metoda enzymatické imunoanalýzy pro stanovení antinukleárních protilátek různého spektra, která je snadno proveditelná a postupně nahrazuje metodu imunofluorescence.

Řada léků může vést k falešně pozitivnímu zvýšení titru antinukleárních protilátek: aminosalicyláty, karbamazepin, isoniazid, methyldopa, prokainamid, jodidy, perorální antikoncepce, tetracykliny, thiazidová diuretika, sulfonamidy, nifedipin, β-blokátory, hydralazin, penicilamin, nitrofurantoin atd., a to vzhledem k schopnosti těchto léků způsobovat interferenci během studie.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]