Poxvirusy: Lidský virus neštovic

(. English Roh - + viry neštovic) Rodina Poxviridae zahrnuje dvě podskupiny: Chordopoxvirinae, který obsahuje poxvirus obratlovců a Entomopoxvirinae, kombinující hmyzího viru neštovic. Podskupina virů neštovic obratlovců obsahuje 6 nezávislých rodů a několik neklasifikovaných virů. Zástupci každého rodu mají běžné antigeny a jsou schopni genetické rekombinace. Rody se od sebe liší o procento DNA a vlastností, umístění a tvaru vláknitých strukturách, ve vnějším plášti virionu, odolnost proti etherem hemaglutinační vlastnosti a jiné charakteristiky.

[1], [2], [3]

Struktura Poxvirusy: Lidský virus neštovic

Představitelé rodu Orthopoxvirus - viry neštovic, opic kloubů a vakcínie. Virus neštovice způsobuje obzvláště nebezpečnou infekci člověka, který byl v polovině sedmdesátých let eliminován snahou světové komunity. XX století. Virus monkeypoxu je patogenní nejen u primátů: u lidí byly popsány případy, které připomínají neštovic v průběhu proudu. Vzhledem k této situaci je užitečné mít obecné představy o mikrobiologii neštovic.

Nejvíce studovaným zástupcem rodu Orthopoxvirus je virus vakcinie, který se vyskytl buď z viru kravské neštovice nebo z viru neštovic. Je přizpůsobena lidskému tělu a dlouhodobě se používá jako první vakcína proti živému viru.

Virus variola a další zástupci tohoto rodu jsou největší ze všech známých zvířecích virů. Jedná se o jeden z nejvíce organizovaných zvířecích virů, blížící se struktuře některých struktur bakteriím. Virion má tvar cihel s poněkud zaoblenými rohy a velikost 250-450 nm. Skládá se z dobře rozpoznatelného jádra (nukleoidu nebo jádra) obsahující genomickou dvojvláknovou lineární DNA molekulu s molekulovou hmotností 130-200 MD spojenou s proteiny. Na obou stranách nukleoidu jsou oválné struktury nazvané proteiny. Jádrové a postranní těla jsou obklopeny zřetelně odlišným povrchem s charakteristickou obroučkou. Jádrová stěna se skládá z vnitřní hladké membrány o tloušťce 5 nm a vnější vrstvy pravidelně uspořádaných válcových podjednotek. Virus má chemické složení připomínající bakteriální: obsahuje nejen protein a DNA, ale také neutrální tuky, fosfolipidy, sacharidy.

Poxvirusy jsou jediné viry obsahující DNA, které se množí v cytoplazmě hostitelské buňky. Cyklus reprodukce viru se skládá z následujících hlavních fází. Po adsorpci na povrch citlivé buňky, virus vstoupí do cytoplazmy receptorem zprostředkované endocytózy a dále je dvoustupňový „stripping“ virionu, nejprve působením buněčné vnější membrány proteázy je zničena, je částečný superearly transkripce a syntéza mRNA kódující syntézu proteinu je odpovědná za další stripování. Souběžně s tím dochází k replikaci vDNA. Kopie dětské DNA jsou přepisovány, syntetizována je pozdní mRNA. Pak tam je vysílán, a 80 syntetizovány k viru specifické proteiny s molekulovou hmotností od 8 do 240 kD. Některé z nich (30) je strukturní proteiny, ostatní - enzymy a rozpustné antigeny. Vlastnosti reprodukce poxvirů lze považovat za změnu buněčných struktur, které se transformují do specializovaných „továrny“, kde dochází k postupnému zrání nových virových částic. Zralé virové potomstvo opouští buňku buď lýzou, nebo buzením. Cyklus reprodukce virů proti neštovicím trvá asi 6-7 hodin.

Virus kiahní má hemaglutinační vlastnosti; Hemaglutinin se skládá ze tří glykoproteinů. Nejdůležitějšími antigeny jsou: nukleoprotein NP, společný pro celou rodinu; termolabilní (L) a termostabilní (C), stejně jako rozpustné antigeny.

Poxviry odolávat sušení (zejména v patologickém materiálu) po mnoho měsíců při teplotě místnosti, jsou odolné vůči esteru v 50% roztoku ethanolu při teplotě místnosti inaktivován po dobu 1 hodiny, a v 50% roztoku glycerolu při 4 ° C přetrvávat několik roky. Odolný vůči většině dezinfekčních prostředků: 1% nebo fenolu a 2% formaldehydu při teplotě místnosti a inaktivují jim pouze po dobu 24 hodin, 5% chloraminu - po dobu 2 hodin.

Lidská bytost je náchylná k viru neštovic, stejně jako opic. Když experimentální infekce v mozku novorozených myší vyvine generalizovanou infekci, která končí smrtící; u dospělých myší je virus nepatogenní. Reprodukuje se dobře u kuracích embryí, pokud jsou infikovány chorionellantoic membránami, amnionem, žloutkovým vakem a alantoidní dutinou. Na chorionallantoické membráně kuřatých embryí ve věku 10-12 dní produkuje virus malých neštovic malé bílé plaky; virus vakcinie způsobuje velké léze s černou dutinou v centru způsobenou nekrózou. Důležitým rozdílným znamením viru variola je maximální teplota rozmnožování viru v kuřecím embryu při 38,5 ° C.

Primární a transplantovatelné buněčné kultury odvozené od lidí, opic a jiných zvířat jsou citlivé na virus variola. Buněčná kultura nádorového původu (HeLa, Vero) viru varioly tvoří plaky malou proliferační typ, zatímco když virus infikuje opičích buněk Vero detekována kolo, s centrem lytických plaků. V ledvinových buňkách embrya prasete může virus viru neštovic způsobit jasný cytopatický účinek, což není případ, kdy jsou buňky infikovány virem monkeypoxu. V buňkách HeLa způsobuje virová neštovicová degenerace kolagenních buněk, zatímco viry kiahní a vajíček velbloud způsobují degeneraci při tvorbě mnohobunkových buněk.

[4], [5]

Patogeneze

Lidé, kteří se zotavují po neštovicích, jsou imunní vůči životu. Dlouhodobě odolná imunita se vytváří po očkování. 2 hlavně humorální neutralizační protilátky se objeví již několik dní po nástupu onemocnění, ale nebrání tomu, aby postupné šíření kožních projevů: pacient může zemřít pustulární fázi, které mají vysokou hladinu protilátek v krvi. Protilátky, které se objevují 8. - 9. Den po imunizaci a dosahují maximálních titrů po 2-3 týdnech, také reagují na umělou imunitu vyvolanou očkováním.

Buněčná imunita hraje neméně důležitou roli než cirkulující protilátky. Bylo zjištěno, že protilátky se nevyskytují u osob s hypogamaglobulinemií protilátek, ale stanou se imunní proti viru neštovic. Tato buněčná imunita je založena na aktivitě T-cytotoxických lymfocytů.

[6], [7], [8]

Epidemiologie

Zdrojem infekce je nemocná osoba. Převážná většina těch, kteří nebyli očkováni proti neštovicím nebo nekvalifikovaným osobám, jsou náchylní k této infekci. Křeček je obvykle přenášen vzdušnými kapkami, ale infekce nelze vyloučit kontaktem (přes oděv, ručníky, ložní prádlo, předměty pro domácnost). Pacient je nakažlivý vůči ostatním po celou dobu vývoje vyrážky až po vymizení posledních krust, ale je nejnebezpečnější v prvních 8-10 dnech, kdy jsou na sliznicích léze.

[9], [10], [11]

Symptomy

Vstupní branou infekce je sliznice horních cest dýchacích. Primární násobení viru se vyskytuje v lymfoidní tkáni faryngálního kruhu, poté krátce proniká do krve a infikuje buňky retikuloendoteliálního tkáně (CMF). Vírus se tam rozmnožuje a znovu je přítomna viremie, ale intenzivnější a prodloužená. Dermatotropní účinek viru je spojen s jeho schopností pronikat z krevního řečiště do epidermis, způsobit časnou proliferaci buněk subkutánních buněk a charakteristickou degeneraci malpighiálních buněk.

Doba inkubace je 8-18 dnů. Křídla začíná akutně: bolesti hlavy, bolesti svalů, prostupování, horečka. Po 2-4 dnech na sliznici úst a kůže je charakteristická vyrážka - všechny prvky téměř současně, jsou lokalizovány více na obličeji a na končetinách. Vyrážka prochází stupněm makuly, papulemi, vezikulemi a pustulami, poté se vytvoří kůra, po níž zůstává jizva jizva. Vzhledem k vyrážce se teplota snižuje a znovu stoupá ve stádiu pustulátů. Od výskytu vyrážky ke ztrátě krust je asi 3 týdny. V tomto klasickém závažnou (variola major) v průběhu úmrtnosti epidemie může dosáhnout 40%: v mírné formy onemocnění - alyastrim (variola minor) - úmrtnost nepřesahuje 1-2%.

Diagnostika

Diagnostiku přírodních neštovic lze provést viroskopickými, virologickými a sérologickými metodami. Nejúčinnější a nejrychlejší metodou je přímá elektronová mikroskopie materiálu odebrané z prvků, před krokem vyrážka puchýřky, jako množství viru v tomto kroku se prudce snižuje. Pod světelným mikroskopem ve formulacích s obsahem bublin detekovány velké buňky s telat Guarnieri, které jsou oválné cytoplazmatické inkluze kolem jádra buňky, obvykle homogenní a acidofilní, granulované a s méně nepravidelnými obrysy. Tauri Guarnieri jsou "továrny", kde se vírus neštovic rozmnožuje. Skvrny připravené z obsahů neštovic lahviček a barvily podle metody M. Morozov, viriony jsou detekovány neštovice - tele Paschenův.

Pro izolaci a identifikaci virových infekcí za použití 12 až 14 dní starých kuřecích embryí chorio-Alantoidní membránu, kde virus formy jemné bělavé plaky a infikované buněčné kultury pro detekci cytopatického efektu nastavení reakčních gemadsorbtsii nebo imunofluorescence. Materiál pro infekci - krev, nazofaryngeální výtok, vyškrabávání kožních prvků vyrážky, krust, stejně jako sekční materiál.

Konkrétní antigen viru neštovic může být detekován na rozmazaných nákladech z vyrážkových elementů a nasofaryngeálního výtoku nepřímou imunofluorescenci. V materiálu prvků vyrážky může být antigen stanoven imunodifuzí, RSK nebo IFM.

Po prvním týdnu onemocnění je možné detekovat virus neutralizující, protilátky vázající komplement a hemaglutininy. Přítomnost komplementů vážících protilátky je považována za nejspolehlivější příznak neštovice, protože u očkovaných pacientů zřídka trvají déle než 12 měsíců.

[12], [13], [14], [15], [16], [17], [18]

Léčba

Pro účely specifické léčby a prevence se používá metisazon (marboran), lék, který potlačuje intracelulární reprodukci viru neštovic. Je zvláště účinný v počátečních stádiích onemocnění a v inkubačním období.

Historie lidské civilizace si pamatuje mnoho epidemií a pandemií neštovic. Pouze v Evropě až do konce 18. Století. Z neštovic bylo zabito nejméně 150 milionů lidí. Po obdržení vakcíny E. Jenner (1796) proti neštovicím začala aktivní boj proti této nemoci, což vedlo k její úplné eliminaci. V Sovětském svazu, neštovice byla zlikvidována v roce 1936, ale na úkor dováženého případech byly zaznamenány před 1960. V roce 1958 na popud sovětské delegace na Světové shromáždění přijalo rezoluci o odstranění neštovice po celém světě a v roce 1967 přijala WHO zintenzivnění programu na eradikaci neštovic. SSSR, USA a Švédsko poskytly tomuto programu rozsáhlou finanční pomoc. Sovětský svaz nejen na pomoc odborníky, kteří pracují v mnoha endemických zemích, ale také osvobodit asi 1,5 miliardy dávek vakcíny proti neštovicím. Použité vakcína zavedena živý virus vakcinie, které se pěstují na určitém lýtka, a potom čistit a vysuší. Dobré výsledky byly také dány kultivací a embryonálními (ovovaccinovými) živými vakcínami. Pro prevenci a léčbu komplikací, plynoucí někdy po očkování, byl použit neštovice donorového imunoglobulinu (10% roztok ve fyziologickém gama-globulin frakce dárců krve specificky revakcinovaným proti neštovicím) imunoglobulinu a obsah lidské krve titrované na neštovice protilátek.

[19], [20]