Polymerázová řetězová reakce (PCR) v diagnostice infekčních onemocnění
Naposledy posuzováno: 23.04.2024
Veškerý obsah iLive je lékařsky zkontrolován nebo zkontrolován, aby byla zajištěna co největší věcná přesnost.
Máme přísné pokyny pro získávání zdrojů a pouze odkaz na seriózní mediální stránky, akademické výzkumné instituce a, kdykoli je to možné, i klinicky ověřené studie. Všimněte si, že čísla v závorkách ([1], [2] atd.) Jsou odkazy na tyto studie, na které lze kliknout.
Pokud máte pocit, že některý z našich obsahů je nepřesný, neaktuální nebo jinak sporný, vyberte jej a stiskněte klávesu Ctrl + Enter.
PCR - jedna z metod pro diagnostiku DNA, které umožňují zvýšit počet kopií detekovatelné části genomu (DNA) bakterií nebo virů, je miliónkrát za použití DNA polymerázy. Test pro tento konkrétní genomového segmentu nukleové kyseliny opakovaně násobená (zesíleného), který umožňuje jeho identifikaci. Za prvé, je molekula DNA bakterie nebo viry zahříváním rozdělena do dvou řetězců, pak v přítomnosti syntetizovaných DNA primerů (sekvence nukleotidů specifických pro definované genomového) je se vazba s komplementárními úseky DNA, syntetizuje druhé vlákno nukleové kyseliny po každého primeru v přítomnosti termostabilní DNA polymerázy , Ukazuje se, že dvě molekuly DNA. Tento proces se opakuje mnohokrát. Pro diagnózu, pouze jedna molekula DNA, tj. Jedna bakterie nebo virus částice. Reakcí další krok - syntéza DNA v molekule RNA za použití enzymu reverzní transkriptázy - umožnila testovat RNA viry, jako je virus HCV. PCR - třístupňový proces, opakované cykly denaturace, nasedání primerů, syntéza DNA (polymerace). Množství DNA syntetizované byl identifikován pomocí ELISA nebo elektroforéza.
PCR může být použita v jiném biologickém materiálu - sérum nebo krevní plazmy, škrábání z močové trubice, biopsie, pleurální tekutiny, cerebrospinální tekutiny, atd. První PCR byla použita pro diagnostiku infekčních onemocnění, jako jsou virové hepatitidy B, viru hepatitidy C, virové hepatitidy D, CMV infekce, infekční sexuálně přenosnou infekce (kapavka, odpadky diynaya, mykoplazmy, Ureaplasma infekce), tuberkulóza, HIV -infekce, atd.
Výhoda PCR v diagnostice infekčních onemocnění oproti jiným metodám výzkumu je následující:
- příčinný činitel infekce může být nalezen v jakémkoli biologickém prostředí těla, včetně materiálu získaného biopsií;
- Je možné diagnostikovat infekční onemocnění v nejranějších stádiích onemocnění;
- Kvantitativní hodnocení výsledků výzkumu je možné (kolik virů nebo bakterií je obsaženo v zkoumaném materiálu);
- vysoká citlivost metody; například citlivost PCR pro detekci DNA viru hepatitidy B v krvi je 0,001 pg / ml (přibližně 4 x 10 2 kopií / ml), zatímco citlivost metody DNA hybridizací za použití rozvětvené sondy - 2,1 pg / ml (přibližně 7 × 10 5 kopií / ml).
[