Imunologické metody diagnostiky dědičných onemocnění

Nedávno, jako důležitý imunologický marker populační genetiky, se začal zvažovat hlavní komplex histokompatibility - HLA (lidské leukocytární antigeny). Antigeny tohoto systému jsou stanoveny imunologicky v krevních leukocytech. Komplex genů HLA je kompaktně umístěn na krátkém ramene chromozomu 6 (6p21.3). Lokalizace tohoto systému a délka lokalizace jeho lokusů na chromozomu umožnily vypočítat, že komplex je přibližně 1/1000 genofondu organismu. Histokompatibilní antigeny se podílejí na regulaci imunitní odpovědi těla při udržování imunitní homeostázy. Vzhledem k jeho polymorfismu a kompaktnosti lokalizace antigenů získala HLA velký význam jako genetický marker.

V současnosti je nalezeno více než 200 alel tohoto systému, je to nejvíce polymorfní a biologicky významný z genetických systémů lidského těla. Porušení různých funkcí hlavního histokompatibilního komplexu přispívá k rozvoji řady nemocí, především autoimunitních, onkologických a infekčních.

V souladu s HLA komplex se nachází na chromozomu 6, jsou tyto lokusy: D / DR, B, C, A. Relativně nedávno objevil nový loci G, E, H, F, jejich biologickou roli aktivně zkoumá v současné době. V hlavním komplexu histokompatibility se rozlišují tři třídy antigenů. Antigeny třídy I jsou kódovány místy A, B, C. Nové lokusy patří do této třídy. Antigeny třídy II jsou kódovány lokusy DR, DP, DQ, DN, DO. Třídy genů I a II kódují transplantační antigeny. Třídy III genů kódujících složky komplementu (C2, C4a, C4b, Bf), a také syntézu několika enzymů izoforem (fosfoglukomutasy, glikoksilazy, Pepsinogen-5, 21-hydroxylázy).

Přítomnost osoby spojená s určitou chorobou Ar nám umožňuje předpokládat zvýšené předispozice k této patologii a s některými korelacemi, naopak odpor vůči ní.

Stanovení antigenů systému HLA se provádí na lymfocytech izolovaných z periferní krve, za použití histotypních sér v mikrolíbotoxické reakci nebo pomocí molekulárně genetických metod.

Zavedení asociativních vazeb mezi onemocněními a antigenem hlavního histokompatibilního komplexu umožňuje:

• identifikovat skupiny s vyšším rizikem vzniku nemoci;
• určovat jeho polymorfismus, tj. Identifikovat skupiny pacientů s rysy průběhu nebo patogeneze onemocnění; ve stejném plánu analýza syntézy onemocnění, objasnění genetických předpokladů pro kombinaci různých forem patologie; sdružení s antigeny, které určují odolnost vůči nemocem, umožňuje identifikovat osoby se sníženým rizikem této patologie;
• provádět diferenciální diagnostiku onemocnění;
• určit předpověď;
• vyvinout optimální léčebnou taktiku.

Vzhledem k tomu, že většina nemocí přímá komunikace s antigeny MHC není dohledat, za účelem vysvětlení souvislost mezi nemocí a antigeny HLA byla navržena teorie „dva geny“, podle kterého se očekává, že gen neexistují (geny) imunitní odpověď (Ir-geny) , úzce příbuzný s HLA antigeny a geny regulujícími imunitní odpověď. Ochranné geny určují odolnost vůči chorobám a geny-provokatéři - citlivost na určité nemoci.

Relativní riziko onemocnění u jedinců s vhodným genotypem se vypočítá podle vzorce: x = [h _p x (1 - h _c )] / [h _c x (1 - h _p )], kde h _p - vlastní frekvence u pacientů, a h _c - v kontrolní skupině.

Relativní riziko ukazuje asociační hodnotu onemocnění s určitým Ar / Ar systému HLA (poskytuje představu o tom, kolikrát riziko onemocnění je v přítomnosti Ar v porovnání s jeho absencí). Čím více tento ukazatel u pacienta, tím vyšší asociativní vztah k nemoci.

Asociace lidských onemocnění s HLA-Ar (genová frekvence,%)

Nemoci	HLA	Kontrolní skupina,%	Pacienti,%	Relativní riziko
Reumatologie
Ankylozující spondylitida	В27	5-7	90-93	90-150
Wrightův syndrom	В27	6-9	69-76	32-49,6
Artritida způsobená infekcemi:
- Yersinia	В27		58-76	17,59
- Salmonella	В27		60-69	17,57
Artritida psoriatická	В13		9-37	4.79
Revmatoidní artritida	Dw4	12-19	48-72	3,9-12,0
	DR4	20-32	70	4,9-9,33
Behcetův syndrom	V5	13. Místo	48-86	7.4 - 16.4
SLE	V5		11-34	1,83
	V8		19-48	2.11
	Bw15	6-10	21-40	5.1
	DR2	26.4	57.1	3.80
	DR3	22.2	46,4	2.90
Syndrom Gujera-Sjogrenova syndromu	V8		38-58	3.15
	DW3	26	69-87	19,0
Kardiologie
IBS	В7	27.8	45,8	2.19
	В14	7.5	14.8	2.14
	V15	11.1	20.4	2.05
	Сw4	18.7	32.8	2.12
Hypertenzní onemocnění	V18	10.4	22.6	2.52
	Aw19	12.6	28.3	2.74
Endokrinologie
Diabetes mellitus 1. Typu	V8	32	52-55	2.1-2.5
	V18		5-59	1,65
	V15	12.	18-36	1,89-3,9
	DW3	26	48-50	2,9-3,8
	Dw4	19	42-49	3,5-3,9
	DR3 DR3 / DR4	20	60	6.10 33
Hypertyreóza	V8	21	35-49	2,34-3,5
	D3	26	61	4.4
	DR3	20	51	4.16
Subakutní tyroiditida (de Kervena)	Bw35	13. Místo	63-73	16,81
	DW1		33	2.1
Addisonova nemoc	V8		20-80	3,88-6,4
	DW3	26	70-76	8,8-10,5
Isenko-Cushingov syndrom	A1		49	2,45
Gastroenterologie
Chudá anémie	В7	19	26-52	1,7-3,1
	DR5	6.	25	5.20
Atrofická gastritida	В7		37	2,55
Peptické vředové onemocnění dvanáctníku	A2	48.1	61,3	1.7
	A10	20.6	63.3	6.65
	В14	4.0	10.3	2.76
	V15	6.6	24.4	4.56
	B40	9,72	23.3	2,82
Autoimunitní hepatitida	V8	16	37-68	2,8-4,1
	DR4	24	71	7.75
Nosiče HBsAg	Bw41		12.	11.16
	V15		10-19	0,29

Nemoci	HLA	Kontrolní skupina,%	Pacienti,%	Relativní riziko
Dermatologie
Psoriáza	Bw17	6-8	22-36	3,8-6,4
	В13	3-5	15-27	4.2-5.3
	Bw16	5	15. Místo	2.9
Herpetiformní dermatitida	V8	27-29	62-63	4.00-4.6
	DR3	19	80	16,60
Sklerodermie	В7	24	35	1.7
Pemphigus	A10			3.1
Atopická dermatitida	В13	6.86	21,28	3,67
	В27	9,94	25,53	3.11
	A10 / B13	0,88	8.51	10,48
Ekzém	A10	19,64	36,67	2,37
	В27	9,94	26,67	3.29
Urtikárie a edém Quincke	В13	6.86	21,21	3,65
	V5,8	1.42	12.12	9,57
	V5,35	0,71	6,06	9.02
Neurologie
Roztroušená skleróza	А3	25	36-37	2.7-2.8
	В7	25-33	36-42	1,4-2,0
	Dw2	16-26	60-70	4.3-12.2
	DR2	35	51.2	1,95
	DR3	20	32.5	1,93
Myasthenie	V8	21-24	52-57	3,4-5,0
	A1	20-25	23-56	3.8
	DR3	26	50	2.5
Pulmonologie
Bronchiální astma (který se onemocněl ve věku 19-30 let)	V21	4.62	12.5	2,95
	В22	9,94	19,64	2.22
	В27	12,31	37.5	4.27
	В35	0,11	5.36	51.4
	B27 / 35	0,47	7.14	16.2
Jiné nemoci
Vasomotorická rýma	А3	26,98	52,38	2,98
	V17	7.57	28,57	4,88
	А3 / 10	2.72	23,83	11,18
	B7 / 17	0,47	9,52	22,28

Údaje v tabulce ukazují, že nejsilnější asociativní vazby jsou identifikovány u nemocí s polygenním nebo multifaktoriálním typem dědičnosti.

To znamená, že stanovení antigenů hlavního histokompatibilního komplexu na krvinek (leukocytů) ukazuje stupeň individuální lidské predispozice na konkrétní onemocnění, a v některých případech pouze výsledky výzkumů pro diferenciální diagnostiku, prognózu, hodnocení a výběr léčby. Například detekce antigenů HLA-B27 se používá při diferenciální diagnostice autoimunitních onemocnění. To se vyskytuje u 90-93% pacientů z kavkazské rasy s ankylozující spondylitidou a Reiterovým syndromem. U zdravých členů této rasy jsou antigeny HLA-B27 detekovány pouze v 5-7% případů. Antigeny HLA-B27 se často nachází v psoriatická artritida, chronické zánětlivé střevní onemocnění, vyskytující se sakroiliitidy a spondylitidu, uveitidy a reaktivní artritidy.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]