Geneticky modifikované imunitní buňky prokazují potenciál zabránit odmítnutí orgánů

V časopise Frontiers in Immunology byla představena buněčná terapie, která dokáže „odzbrojit“ vysoce imunosenzibilizované pacienty před transplantací orgánů. Vědci vytvořili regulační T buňky (Treg) s chimérickým receptorem protilátek proti HLA (CHAR) – v podstatě s „návnadou“ proteinu HLA-A2, který zapíná Treg při kontaktu s B buňkami produkujícími protilátky proti HLA-A2. In vitro tyto CHAR-Treg rozpoznávaly a potlačovaly produkci IgG s vysokou afinitou u presenzibilizovaných pacientů, přičemž si zachovaly „identitu“ Treg (FOXP3/HELIOS) a nezabíjely cílové buňky. To poskytuje šanci na cílenou desenzibilizaci bez úplné imunosuprese.

Pozadí studie

V transplantologii je hlavním „střetem zájmů“ protilátky proti HLA antigenům dárce. Po transfuzích, těhotenstvích nebo předchozích transplantacích se u příjemce často vyvine senzibilizace: v krvi již cirkulují anti-HLA IgG a paměťové B-buňky, připravené k rychlému „rozvinutí“. Tito pacienti jsou méně kompatibilní, déle čekají na orgán a mají vyšší riziko akutní a chronické rejekce protilátek. Standardní desenzibilizační protokoly (plazmaferéza/imunoadsorpce, vysoké dávky IVIG, rituximab, inhibitory proteazomu, imlifidáza) působí široce a zhruba: snižují celkový pool protilátek nebo buněk, ale necílí na specifické „nebezpečné“ klony a jsou doprovázeny riziky toxicity a infekce.

Imunitní systém má svou vlastní „brzdu“ – regulační T buňky (Treg), které udržují toleranci vůči „cizímu“. V posledních letech se terapie Treg stala skutečnou klinickou strategií, ale ve „standardní“ verzi je neselektivní: injekčně aplikované buňky nerozlišují, proti kterému antigenu se reakce vyvíjí. Vědci se proto snaží „přišroubovat k cíli“ – vybavit Treg umělými receptory, které se spustí pouze tehdy, když narazí na správný signál. Tak vznikla myšlenka chimérických receptorů (podobných CAR technologiím), ale sestavených nikoli na bázi anti-CD19, ale z domén samotných molekul HLA, takže Treg se aktivují v blízkosti B buněk produkujících odpovídající protilátky proti HLA.

Kritické požadavky na takové „cílené“ Treg buňky jsou dvojí. Zaprvé, musí zůstat skutečnými Treg buňkami (udržovat si FOXP3/HELIOS a supresorové programy), aniž by narušily efektorový fenotyp na pozadí silné stimulace. Zadruhé, jejich působení musí být cílené: potlačovat přesně alospecifické B-klony a plazmoblasty, minimálně zasahovat do zbytku imunitního systému, aby se nezvyšovaly náklady na léčbu infekcí a riziko nádorů. Pokud se tento problém vyřeší, objeví se metoda pro měkkou, přesnou desenzibilizaci před transplantací a snížení potřeby celkové imunosuprese po ní.

A konečně praktický kontext: u některých pacientů je senzibilizace zaměřena na jednu nebo dvě „problematické“ alely (např. HLA-A2) a právě ty blokují přístup k orgánům. Buněčná terapie zaměřená na taková „úzká hrdla“ může rozšířit skupinu kompatibilních dárců, urychlit transplantaci a snížit výskyt odmítnutí protilátek – zejména u dětí a u příjemců s dlouhodobým „historickým“ kontaktem s cizím HLA (vícenásobné transfuze, opakované transplantace). Důkaz principu pro Treg indukované anti-HLA je proto důležitým krokem k personalizované imunomodulaci v transplantologii.

Jak je nová buňka strukturována

• Konstrukce: extracelulární doména HLA-A2 + pant CD8 + transmembránový CD28 + signální "tandem" CD28-CD3ζ. Tento receptor je aktivován, když je na povrchu B-buňky protilátka proti HLA-A2.
• Specifičnost: CHAR-Treg „startují“ specificky na anti-A2 B-buňkách, aniž by ovlivňovaly další imunitu.
• Profil Safe Treg: po aktivaci neztrácejí čárové značky (FOXP3, HELIOS), tj. zůstávají „brzdy“ a nepřepínají se na „plyn“.
• Necytotoxické: Na rozdíl od modifikovaných konvenčních CD4 T buněk se stejným receptorem CHAR-Treg nezabíjí buňky anti-A2, ale potlačuje jejich funkci.

Co přesně bylo kontrolováno?

• Model pacienta ex vivo: Mononukleární buňky v krvi pacientů presenzibilizovaných HLA-A2 byly primárně stimulovány stimuly (HLA-A2-K562), poté byly přidány CHAR-Treg a bylo měřeno složení IgG (ELISA) a B-buněk (spektrální průtoková cytometrie, UMAP).
• Výsledek: po 48 hodinách a 5 dnech byla produkce IgG významně snížena (u 2 ze 3 vzorků pacientů), podíl B buněk se obecně snížil bez zjevné „volby“ mezi podtypy (naivní, paměťové, marginální zóna, plazmoblasty).
• Interpretace autorů: Citlivost testu lze zvýšit pomocí ELISA testu specifického pro anti-A2 a samostatným stanovením tříd IgG; je nutné testování u většího počtu pacientů a na další alely HLA (např. A24).

Proč je to důležité pro transplantaci?

Dnes má 20 % primárních a až 75 % opakovaných příjemců již protilátky proti HLA, což dramaticky zužuje okruh vhodných dárců a vede k nutnosti vysokých dávek imunosuprese. Neselektivní desenzibilizační protokoly (plazmaferéza, „nulování“ B-buněk) nefungují hladce a jsou plné komplikací – od infekcí až po nefro- a neurotoxicitu (zejména u dětí). Cílené Treg, působící pouze proti „nebezpečným“ B-klonům, teoreticky umožňují rozšířený přístup k orgánům a sníženou celkovou toxicitu po transplantaci.

• Klíčové potenciální výhody:
  • Před transplantací: „odstraňte“ senzibilizaci na specifický HLA a srovnejte pacienta s nesenzibilizovaným pacientem.
  • Po transplantaci: snížit dávky základní imunosuprese a riziko chronické rejekce protilátek.
  • Po transplantaci: Tento přístup má potenciální uplatnění u HCV a dokonce i v případech potratu, kdy si matka vyvine protilátky proti otcovu HLA.

Co říkají samotní autoři a tiskové zprávy

Tým MUSC (USA) označuje tuto práci za „první krok k cílené imunosupresi: potlačení přesně těch B buněk, které ohrožují transplantaci, přičemž zbytek imunitního systému je ponechán na pokoji.“ Zpráva zdůrazňuje potenciál snížit vedlejší účinky a „vyrovnat podmínky“ pro ty, u kterých je v současné době transplantace kvůli těžké senzibilizaci téměř nemožná.

Kde jsou hranice a co bude dál?

• Jedná se o in vitro/ex vivo důkaz principu na malém počtu vzorků pacientů: je příliš brzy hovořit o klinické praxi. Jsou zapotřebí první studie na lidech, validace různých HLA a hloubková mechanistická analýza (sekretované faktory, kontaktně závislá suprese, transkriptomika CHAR-Treg).
• Je důležité vypracovat specificitu a bezpečnost: zajistit, aby potlačení bylo striktně zaměřeno na antigen a nenarušovalo ostatní složky imunity.

Na co si vzpomenout

• Treg buňky s „návnadou“ HLA-A2 rozpoznávají a potlačují B buňky, které jsou pro transplantaci nebezpečné.
• In vitro snižují produkci IgG u senzibilizovaných pacientů a udržují stabilitu fenotypu Treg bez cytotoxicity.
• Jedná se o cílenou alternativu k neselektivní desenzibilizaci s potenciálem snížit dávky imunosupresivních léků a rozšířit přístup k transplantacím. Dalším krokem jsou klinické studie.

Zdroj: Valentín-Quiroga J. a kol. Chimérické lidské regulační T buňky s modifikovaným anti-HLA receptorem potlačují alloantigen-specifické B buňky u presenzibilizovaných příjemců transplantátu. Frontiers in Immunology, publikováno 15. srpna 2025. DOI: 10.3389/fimmu.2025.1601385