Použití buněčných technologií ke zlepšení vzhledu jizev

Moderní věda se vyznačuje rychlým rozvojem řady příbuzných oborů, pod souhrnným názvem „biotechnologie“. Tento vědní obor, založené na nejnovější poznatky v oblasti biologie, cytologie, molekulární genetiky, genetické inženýrství, transplantantologii, si klade za cíl využít obrovský potenciál rostlinných a živočišných buňkách - základní stavební jednotku všech živých věcí. „Živá buňka je připravena biotechnologické reaktoru, ve kterém jsou realizovány nejen procesy, které vedou ke vzniku konečného produktu, ale i celá řada dalších systémů usnadnit udržování katalytické aktivity na vysoké úrovni“ - John Woodward, 1992. Výchozí věda buňky byl uveden v v roce 1665, kdy britský fyzik R.Guk vytvořili první mikroskop a našel buňku v dopravní zácpě - cellulae ( «cell»). V roce 1829 M.Shleyden a T.Shvann opodstatněné „teorii buňka“, který tvrdil, že všechny živé věci jsou složeny z buněk. R.Virhov v roce 1858 se ukázalo, že základem všech nemocí je porušením struktury a metabolismu buněk. Stal se zakladatelem "buněčné patologie". Základní příspěvek k vědě o buňce byl vytvořen v letech 1907-1911. R.Garrison a A.A.Maksimov, což dokazuje možnost kultivace buněk mimo tělo. Jejich práce ukázaly, že buněčné kultury, zvířecí tkáně a části rostlin, musí být mechanicky odděleny, aby se malé kousky. K izolaci buněk z tkáně snížit prudkým mikrotomu nožem nebo výbrusech přibližně 0,5 až 1,0 mm. Fyzické rozdělení buněk se nazývá imobilizace. Izolované buňky se získají enzymatickou disperzí kusů rostlin nebo tkání. Po broušení ostré nůžky, kousky ošetřené trypsinem nebo kolagenázy, aby se získala suspenze - suspenze jednotlivých buněk nebo mikroagregáty ve zvláštním prostředí. Alginátové gely (alginát vápenatý) jsou široce používány k imobilizaci rostlinných buněk. Je dokázáno, že imobilizované rostlinné a živočišné buňky si udržují schopnost biosyntézy. Biosyntézy buněčné produkty se hromadí v buňkách, jejich exprese se vyskytuje buď spontánně nebo s pomocí speciálních látek, které zvyšují propustnost buněčných membrán.

Kultivace živočišné buňky - mnohem složitější proces než kultivaci rostlinných buněk, což vyžaduje speciální vybavení moderních, špičkových technologií, dostupnost různých médií, růstovými faktory, které jsou určeny pro zachování životaschopnosti buněk a udržovat je ve stavu vysoké funkční aktivity. Bylo zjištěno, že většina buněk pevných tkání, jako jsou ledviny, játra, kůže a jsou závislé na povrchu, tak in vitro, mohou být kultivovány pouze v podobě monovrstev nebo tenkých vrstev, které jsou přímo spojené s povrchu substrátu. Životnost, proliferace a funkční stabilita buněk získaných enzymatickou disperzí tkání závisí do značné míry na substrátu, na kterém jsou pěstovány. Je známo, že všechny buňky získané z tkání u obratlovců mají negativní povrchový náboj, takže kladně nabité substráty jsou vhodné pro jejich imobilizaci. Izolované buňky získané přímo z celých tkání mohou být udržovány v primární kultuře v imobilizovaném stavu při zachování vysoké specifičnosti a citlivosti po dobu 10-14 dnů. Imobilizované, povrchově závislé buňky hrají dnes významnou roli v biologii, zejména jejich role je důležitá pro klinické studie. Používají se ke studiu cyklů buněčného vývoje, regulace jejich růstu a diferenciace, funkčních a morfologických rozdílů mezi normálními a nádorovými buňkami. Imobilizované monovrstvy buněk se používají v biotestách, pro kvantitativní stanovení biologicky aktivních látek a pro studium účinků různých léků a toxinů na ně. Velký zájem o buňku, jako zdravotnický prostředek, dokazují lékaři všech specialit několik desetiletí. V tomto směru se buňkové technologie rychle rozvíjejí.

Při nástupu tkáňové a buněčné terapie se jméno známého ruského vědce V.P. Filatov, který v roce 1913 byl položen základ pro učení tkáňové terapie studuje rohovky zdravých dárců s pacienty s šedým zákalem .. Při provozu, transplantace rohovky, zjistil, že rohovky zachovány v chladu po dobu 1-3 dní při teplotě -2 -4 ° C je lepší než čerstvý. Tak bylo zjištěno, buňky přidělit vlastnost za nepříznivých podmínek, některé látky, které stimulují životně důležitých procesů v transplantované tkáně a tkáně v regenerační příjemce. Tkáň a buňky oddělené od těla jsou ve stavu zkušeností, tj. Zpomalují život. V nich dochází k zastavení krevního oběhu a následně k výživě. Tkáňové dýchání je extrémně obtížné, inervace a trofie jsou rozrušené. Být v novém kvalitativním stavu, přizpůsobit se novým podmínkám existence buněk produkovat specifické látky s léčivými vlastnostmi. Tyto látky neproteinové povahy jmenoval VP Filatov biogenní stimulant. To V.V.Skorodinskoy nastavit společně s materiálem ze zvířat a rostlin, může být volně ● Vyrovnávací autoklávovány při 120 ° C po dobu jedné hodiny po skladování za nepříznivých podmínek, v době, kdy nejen neztratil aktivitu, ale naopak posílen, vzhledem k výtěžku biologických stimulantů z konzervovaných tkání. Kromě toho ztratily antigenní vlastnosti, což výrazně omezilo možnost odmítnutí. Konzervované sterilní materiál vstřikován do těla implantací (naředěním) pod kůži nebo ve formě extraktů ze vstřikování, čímž se získá odpovídající výsledky. Bylo také zjištěno, že fetální tkáně obsahují významně větší množství biologicky aktivních látek, než dospělé tkáně, a některé faktory nalézt pouze v embryích. Inokulovány fetální příjemce tkáně organismu, který není vnímán jako cizí nepřítomnosti ve složení cytoplazmatických membránových proteinů odpovědných za druhy, tkáně, a individuální specificity (proteiny hlavního histokompatibilního komplexu). V důsledku očkování ve fetálních lidských tkání zvířat nespouští imunologické obranné mechanismy a reakce, a odmítnutí nekompatibility. VP Filatov v lékařské praxi široce používá lidskou placentu a kůži. Předměty léčba sestávala z 30-45 vstřikovacích tkáňových extraktech a 1-2 implantací autoklávovány tkáně.

Poté, co začal výzkum s lidskými a zvířecími tkáněmi a buňkami, přenesl své zobecňování do rostlinného světa. Produkující pokusy na živých částech rostlin (aloe, jitrocel, agáve, topy řepy a třezalky tečkované, atd), stvořil nepříznivým podmínkám umístěním řez listy v temném místě, jako po celou dobu životnosti elektrárny potřebuje světlo. Z bahnité rašeliny a rašeliny byly také přiděleny biogenní stimulátory vzhledem k tomu, že bahno a rašelina se tvoří za účasti mikroflóry a mikrofauny.

Nové kolo vývoj tkáňové terapie získal na konci 70. Let, kdy nahromaděné znalosti a desetiletí zkušeností umožnily zcela novou úroveň použít živočišné i rostlinné tkáně a buňky pro léčení lidí a prodloužit jeho životnost aktivní. Takže v některých místních klinikách a řadou zahraničních žen ve fyziologickém menopauzy, menopauze nebo pozadí ooforektomií pro zpomalení procesu stárnutí, rozvoj aterosklerózy, osteoporózy, dysfunkce imunitního, endokrinního a nervového systému začaly pořádat tkáňové terapie fetální tkáně placenty, hypotalamu, játra, vaječníků, thymusu a štítné žlázy. V jednom z nejprestižnějších Gerontius-kosmetické kliniky v západní Evropě pro stejný účel po celá desetiletí s použitím výtažky injekce, odvozené z fetálních tkáních pohlavních žláz ovcí.

U nás byla také široce využívána biostimulační léčba. U pacientů s různými chorobami až do nedávné doby se aktivně podávat injekce placenty extrakty, aloe, kolanhoe, rozchodníky velké (biosed) malých lží, peloidodistillyat, peloidin, torfot, gumizol připravených Filatov řízení. V současné době v lékárnách je téměř nemožné koupit tyto vysoce výkonné a low-cost domácí tkáňových preparátů živočišného, rostlinného a minerálního původu.

Podkladové získat různé výživové přípravky z tkání a orgánů lidského dovážených, jako Rumalon (z tkáně chrupavky a kostní dřeně) aktovegin (z telecí krve) solkoseril (extraktu krevního dobytek) a domácích drog - skelný ( skelné dobytek oko) kerakol (od rohovky skotu), splenin (ze sleziny skotu), epitalyamin (od epitalyamo-epifýzy oblasti) také spadají Filatov výzkum. Společnou vlastností pro všechny tkáňové přípravky je celkový účinek na celý organismus. To znamená, že „tkáň terapie“ akademik Filatov byl základem většiny moderních vývoje a trendy v chirurgii, imunologie, porodnictví a ginekoloii, gerontologie, combustiology, dermatologie a kosmetické související buňky a produkty jeho biosyntézy.

Problém transplantace tkání se staral o lidstvo od starověku. Takže v papyru Eberse z 8.000 př.nl je již zmínka o použití transplantace tkání, aby se kompenzovaly vady v jednotlivých částech těla. Ve "knize života" indického vědce Sushruty, který žil na 1000 litrů. BC podrobný popis obnovy nosu z kůže na tvářích a na čele.

Potřeba kůže dárce rostla v poměru k nárůstu počtu plastických a rekonstruktivních operací. V tomto ohledu začala používat kadaverickou a plodovou pokožku. Tam byla potřeba pro zachování dárcovských zdrojů a identifikovat příležitosti pro lidské kožní tkáně náhradních zvířat různých provedení simulace kůže. A právě v této oblasti pracují vědců, když v roce 1941 P.Medovar nejprve ukazoval základní možnosti růstu keratinocytů in vitro. Dalším důležitým krokem ve vývoji mobilních technologií byla práce Karasek M. A M. Charlton, který v roce 1971 provedl první úspěšnou transplantaci autologních keratinocytů z primární kultury ze králičích ran, za použití jako substrát pro pěstování KC kolagenového gelu, čímž se zlepšuje buněčnou proliferaci v kultuře. J.Rheinvvald. H Zelená. Vyvinuli technologii pro sériovou kultivaci velkého množství lidských keratinocytů. V roce 1979, Green a jeho spolupracovníci zjistili, vyhlídky na medicínské použití keratinocytů buněčné kultury při obnově kůže s rozsáhlými popáleninami, po kterých se tato technika neustále zlepšila, to začalo být používán lékaři hořet center v zahraničí i v naší zemi.

V procesu studium živých buněk ukázala, že buňky produkují nejen biogenní stimulátory nebílkovinného původu, ale také řadu cytokinů, neurotransmiterů, růstové faktory, polypeptidy, které hrají důležitou roli v regulaci homeostázy celého organismu. Bylo zjištěno, že v různých buňkách a tkáních jsou obsaženy peptidové bioregulátory. Které mají širokou škálu biologických účinků a koordinují vývoj a fungování mnohobuněčných systémů. Byla zahájena doba aplikace buněčné kultury jako terapeutického činidla. V našem tansplantatsiyu pozastavení země fibroblastových a keratinocytu buněčných vrstev laminovaných v posledních deseti letech jsme přijali v combustiology. Takové aktivní zájem o transplantaci kožních buněk spálených vzhledem k nutnosti rychlého uzavření velkých popálenin ploch a deficitu dárců kůže. Možnost malého kousku kůže největší odlišit buňky, které mohou pokrýt povrch rány v roce 1000 a dokonce 10 000 krát větší než plocha pleti dárcovské byla velmi atraktivní a důležité pro Combustiology a popáleninách. Procento přihojení keratinocytů vrstvy se liší v závislosti na oblasti hoření, věku a zdravotním stavu pacienta z 71,5 na 93,6%. Zájem o transplantace keratinocytů a fibroblastů spojené nejen se schopností rychle uzavřít defekt v kůži, ale také s ohledem na skutečnost, že tyto transplantace mají silnou bioaktivní potenciál zlepšit vzhled tkání odvozených od transplantace. Novotvary cév, odstranění hypoxie, zlepšení trofiku, urychlení zrání nezralých tkání - že morfologicko-funkční základ těchto pozitivních změn, které probíhají v důsledku uvolnění z transplantovaných buněk, růstových faktorů a cytokinů. Tak, a to díky zavedení do klinické praxe vyspělých mobilní technologie transplantaci mnohobuněčných vrstev autologních i allogenních keratinocytů a fibroblastů na rozsáhlých ranných ploch, Combustiology měli možnost nejen ke snížení úmrtnosti vystřelil s velkým procentem kožních lézí, ale také ke zlepšení kvality zjizvenou tkáň, která nevyhnutelně se vyskytuje na místě popálenin IIb a IIIa a 6 stupňů. Zkušenosti combustiologists získané při léčbě ran ploch u pacientů s popáleninami přišel s nápadem použít již upravený Greenova metody v dermatologii a chirurgické praxi v různých kůži a kosmetické patologie (trofické vředy, vitiligo, névus, epidermolysis bullosa, odstranění tetování, související s věkem kožní změny, stejně jako zlepšit vzhled jizev).

Použití alogenní keratinocytů v chirurgii, dermatologii a combustiology má několik výhod oproti primeneiya autologních keratinocytů jako buněčný materiál je možno připravit předem v neomezeném množství, konzervované a v případě potřeby použít. Je také známo, že alogenní KC mají sníženou antigenní aktivitu, jako když jsou kultivovány in vitro ztratit Langerhansovy buňky, které jsou nositeli HLA komplexních antigenů. Ve prospěch použití alogenní KC také říká, že jsou nahrazeny autologní po transplantaci, podle různých autorů v období od 10 dnů až 3 měsíce. V tomto ohledu je dnes mnoho zemí zavedly buněčné banky, prostřednictvím kterého můžete přijímat transplantaci buněk ve správném množství a ve správný čas. Takové banky jsou v Německu, USA a Japonsku.

Zájem o využití mobilních technologií v dermatologii a kosmetice vzhledem k tomu, že „buněčná kompozice“ nesou silné bioenergetické a informační potenciál, díky němuž je možné dosáhnout kvalitativně nové výsledky léčby. Autokiny (růstové faktory, cytokiny, oxid dusnatý, a další.) Přidělené transplantované buňky působí především na svých vlastních fibroblastů, zvýšení jejich syntetické a proliferační aktivitu. Tato skutečnost je zvláště atraktivní pro výzkumné pracovníky, fibroblastů je klíčovým buněk dermis, funkční aktivita, která je závislá na stavu všech vrstev kůže. Je také známo, že po poranění kůže Cauter, laser, jehly a další nástroje, z kostní dřeně, tukové tkáně a kapilární pericyt je doplněn s čerstvým kožních fibroblastů kmenových prekurzorů, která podporuje „omlazení“ pool vlastní buňky. Aktivně začnou syntetizovat kolagen, elastin, enzymy, glykosaminoglykany, růstové faktory a jiné biologicky aktivní molekuly, což vede ke zvýšení hydratace a vaskularizace derma, zlepšuje její pevnost,